(共34张PPT)
第1节 植物细胞工程
第二章 细胞工程
细胞工程是指应用细胞生物学、分子生物学和发育生物学等多学科的原理和方法,通过细胞器、细胞或组织水平上的操作,有目的地获得细胞、组织、器官、个体或其产品的一门综合性的生物工程。
动物细胞工程
植物细胞工程
原理
操作水平
目的
植物组织培养
植物体细胞杂交
细胞工程的概述
书P32 细胞工程的发展历程
是指将离体的植物器官、组织或细胞等,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其形成完整植株的技术。
外植体
植物细胞的全能性
原理
生殖方式
无性生殖
分裂方式
有丝分裂
植物组织培养
每一个细胞含有控制该生物发育的全部基因
原因
1)受精卵>胚胎干细胞>生殖细胞>体细胞
2)植物细胞>动物细胞
比较
为什么生物体内细胞并不都表现全能性?
在特定的时间和空间条件下,细胞中的基因会选择性表达
必修1-P121
细胞全能性:细胞经过分裂和分化后,仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能
如何才能让细胞表现出全能性?
植物组织培养
离体;一定的营养物质、植物激素;适宜的温度、pH、无菌等外界条件
种子萌发成幼苗,能否体现细胞的全能性?
不能。种子萌发形成幼苗是自然生长的结果。
植物组织培养常用的培养基配方
书P116
⑴培养基名称: ;
⑵物理性质: ;
⑶碳源: 。
包括无机营养成分(水和无机盐)、有机营养成分(蔗糖、氨基酸、维生素等)、特定浓度和比例的激素(主要是生长素和细胞分裂素)
作为碳源,提供能量,调节渗透压
植物组织培养
植物组织培养的流程:
脱分化:已分化细胞,失去其特有结构和功能而转变成未分化的细胞过程。
愈伤组织:不定形的薄壁组织团块。
再分化:愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程。
有细胞增殖(有丝分裂),没有细胞分化。
既有细胞增殖(有丝分裂),又有细胞分化。
脱分化
接种外植体
诱导愈伤组织
再分化
诱导生芽
诱导生根
移栽成活
植物组织培养
书P36菊花的组织培养
植物组织培养
如何对外植体进行消毒?
①制备外植体
目的是?
防止杂菌生长。一方面与培养物竞争营养;另一方面产生有害物质危害培养物。
书P36菊花的组织培养
植物组织培养
接种操作在哪里进行?
②接种到诱导愈伤组织培养基
酒精灯火焰旁、超净工作台
该过程称为_________;
____________光照
倒插
接种时注意外植体的方向,
不要________
脱分化
不需要
书P36菊花的组织培养
植物组织培养
③接种到诱导生芽培养基
→诱导生根培养基
诱导生芽
诱导生根
该过程称为_________;
_________给予适当时间和强度的光照
再分化
需要
原因是?
促进叶绿素的形成,以进行光合作用
书P36菊花的组织培养
植物组织培养
④移栽
细胞分裂素
生长素
芽分化
愈伤组织
根分化
巧记:高根低芽中愈伤
生长素用量 / 细胞分裂素用量 结果
比值≈1
比值>1
比值<1
促进根的分化
促进芽的分化
促进愈伤组织的形成
生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素。它们的浓度、比例都会影响植物细胞的发育方向。
决定植物脱分化、再分化的关键因素是什么?
植物组织培养
书P37 进一步探究2.
培养基、接种工具灭菌不彻底;
外植体消毒不彻底;
操作过程不符合无菌操作要求等。
被污染的培养基
书P36 结果分析与评价1.接种3~4d后,检查外植体的生长情况,统计有多少外植体被污染,试分析它们被污染的可能原因。
植物组织培养
书P36 注意1.实验中使用的培养基和所用的器械都要灭菌。接种操作必须在酒精灯火焰旁进行,并且每次使用后的器械都要灭菌。
通过该方法获得的植株,在遗传特性上与亲本相比有什么特点?
该种繁殖方式是有性繁殖还是无性繁殖?
遗传物质与亲本相同
无性繁殖
根、芽
植物体
再分化
培养条件:①无菌②营养物质③适宜条件(温度、pH、光等)
④植物激素
脱分化
愈伤组织
离体的植物器官、组织或细胞(外植体)
愈伤组织重新分化为芽、根等器官
失去特有结构和功能转变成未分化的细胞
生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键。生长素和细胞分裂素的比例和浓度会影响植物细胞的发育方向。
不定形的薄壁组织团块
植物组织培养
光照
芽发育成叶,叶肉细胞中叶绿素的合成需要光照
册P49 例1、2
通过有性杂交能实现吗?为什么?
西红柿
土豆
×
不能,不同种物种间存在生殖隔离
植物体细胞杂交技术:将不同来源的植物体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新植物体的方法。
有没有方法可以打破生殖隔离,实现远缘杂交育种,获得“番茄-马铃薯杂种植株”呢?
植物体细胞杂交技术
植物体细胞杂交技术
阅读课本37—38页内容,思考并小组讨论以下问题:
1、植物体细胞杂交技术的原理是什么?
2、为什么要去除细胞壁?
用什么方法可以温和地去除细胞壁而不伤害原生质体?
3、诱导原生质体融合的方法有哪些?
4、如何将杂种细胞培养成杂种植株?
诱导原生质体融合的方法有哪些?
植物细胞融合完成的标志?
原生质体融合的原理是什么?
A细胞
B细胞
去壁
物理法:电融合法、离心法等
化学法:聚乙二醇(PEG)融合法等
A原生质体
B原生质体
去壁
技术流程:
正在融合的原生质体
再生细胞壁
植物体细胞杂交技术
为什么要去除细胞壁?
用什么方法可以温和地去除细胞壁而不伤害原生质体?
细胞壁若不去除,会阻碍细胞之间的杂交
纤维素酶和果胶酶(酶解法)
融合后的原生质体再生出细胞壁
细胞膜的流动性
必修一:人-鼠细胞融合实验(荧光标记实验)
细胞壁
细胞膜
细胞质
液泡
细胞核
指的是脱去细胞壁的细胞。动物细胞也可看做是原生质体。
原生质体
成熟植物细胞的细胞膜、液泡膜和介于这两层膜之间的细胞质。
原生质层
区分原生质体与原生质层
【注意】质壁分离的“质”指的是原生质层
技术流程:
植物体细胞杂交技术
A细胞
B细胞
去壁
正在融合的原生质体
A原生质体
B原生质体
去壁
再生细胞壁
如何将杂种细胞培养成杂种植株?
植物组织培养技术
原理:植物细胞具有全能性
脱分化
再分化
移栽
杂种植株
愈伤组织
移栽后的植株
植物体细胞杂交完成的标志
意义:打破生殖隔离,实现远缘杂交育种
假设A细胞、B细胞均为二倍体,体细胞染色体数分别为20、18。通过植物体细胞杂交技术获得的杂种植株,体细胞染色体数目是多少?有多少染色体组?
植物体细胞杂交技术
38
从杂种植株的染色体组成上看属于何种变异?
染色体数目变异
异源多倍体
4
书P38 二、“番茄—马铃薯”超级杂种植株没有如科学家所想象的那样,地上长番茄、地下结马铃薯的主要原因是什么?
植物体细胞杂交技术
生物基因的表达不是孤立的,它们之间是相互调控、相互影响的,所以番茄—马铃薯杂交植株的细胞中虽然具备两个物种的遗传物质,但这些遗传物质的表达相互干扰,不能像马铃薯或番茄植株中的遗传物质一样有序表达。
册P50 例3、4
植物细胞工程的应用——植物繁殖的新途径
铁皮石斛的工厂化生产
植物细胞工程的应用——植物繁殖的新途径
1、快速繁殖,也叫微型繁殖,是用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。
①原理:植物细胞的全能性
②优点:高效、快速地实现种苗的大量繁殖,保持优良品种的遗传特性
③过程:植物组织培养(书P35 图2-1)
册P63 1.下列属于生物的快速繁殖技术的是( )
A.兰花的芽尖组织培育成兰花幼苗 B.水稻种子萌发并长成新个体
C.扦插的葡萄枝长成新个体 D.柳树芽发育成枝条
A
*扦插、压条、嫁接等不属于微型繁殖技术
植物细胞工程的应用——植物繁殖的新途径
为什么马铃薯繁殖多代之后产量会下降?
用无性繁殖的方式进行繁殖的作物,感染的病毒很容易传给后代,并在作物体内逐年积累,会导致作物产量降低、品质变差。
2、作物脱毒(培育脱毒苗)
①选材部位:
顶端分生区附近(如茎尖)
选材原因:分生区附近的病毒极少,甚至无病毒
③优点:脱毒作物的产量和品质明显优于没有脱毒的作物
②原理:植物细胞的全能性
植物细胞工程的应用——植物繁殖的新途径
脱毒产品
香蕉
脱毒草莓
普通草莓
甘蔗
菠萝
植物细胞工程的应用——作物新品种的培育
书P42 二、1.紫色非甜玉米(基因型AASuSu)和白色甜玉米(基因型aasusu)杂交(Su和su代表一对等位基因),得到的F1(AaSusu)再进行自交,F2会有紫色甜玉米的表型产生。如果运用常规育种方法,应该如何筛选出纯合的紫色甜玉米?
P:
紫色非甜玉米
AASS
×
白色甜玉米
aass
F1
紫色非甜玉米
AaSs
↓
第1年
↓
×
F2
A_ss
第2年
连续自交
紫色甜玉米
将获得的紫色甜玉米进行连续自交,即将每次自交后代的紫色甜玉米选育后再进行自交,直至自交后代中不再出现白色甜玉米为止。
这种方法比较烦琐,耗时也较长。如何解决育种时间过长的问题?
植物细胞工程的应用——作物新品种的培育
1、单倍体育种
①过程:
花药离体培养
诱导染色体加倍
二倍体植株
单倍体植株
二倍体植株(纯合子)
(秋水仙素处理)
②原理:染色体数目变异、植物细胞的全能性
书P42 二、1.紫色非甜玉米(基因型AASuSu)和白色甜玉米(基因型aasusu)杂交(Su和su代表一对等位基因),得到的F1(AaSusu)再进行自交,F2会有紫色甜玉米的表型产生。如果运用常规育种方法,应该如何筛选出纯合的紫色甜玉米?
植物细胞工程的应用——作物新品种的培育
单倍体育种
P:
紫色非甜玉米
AASS
×
白色甜玉米
aass
紫色非甜玉米
AaSs
↓
配子:
AS
As
aS
as
花药离体培养
F1
单倍体幼苗:
AS
As
aS
as
纯合体:
AASS
AAss
aaSS
aass
选择紫甜玉米即为新品种
人工诱导染色体加倍
优点:
①极大地缩短了育种的年限。
②大多数单倍体植株的细胞中只含一套染色体,染色体加倍后得到的植株的隐性性状容易显现,是进行体细胞诱变育种和研究遗传突变的理想材料。
植物细胞工程的应用——作物新品种的培育
册P61
B
母体延伸:(1)题中过程①②包括哪两个阶段?
(2)单倍体植株经秋水仙素诱导处理后得到的植株都是纯合子吗?
脱分化、再分化
不一定。对于二倍体形成的单倍体来说,是正确的。
对于多倍体来说,不正确。如四倍体植株(基因型AAaa)形成的单倍体幼苗(基因型:AA、aa、Aa 3种),经秋水仙素处理后,基因型为AAAA、aaaa、AAaa,其中AAaa为杂合子。
植物细胞工程的应用——作物新品种的培育
愈伤组织细胞不断分裂,细胞要进行DNA分子复制,因此更易发生突变。
2. 突变体的利用
①产生原因:在植物组织培养过程中,由于培养细胞一直处于不断增殖的状态,因此容易受到培养条件和诱变因素(如射线、化学物质等)的影响而产生突变。
②过程:
外植体
脱分化
愈伤组织
再分化
突变体
筛选培育
新品种
诱变处理的对象?为什么?产生的变异一定符合需要吗?
不一定,因为突变是不定向的。
诱变处理
③原理:
突变(基因突变和染色体变异)和植物细胞的全能性。
植物细胞工程的应用——细胞产物的工业化生产
应用多、产量低
一类小分子有机化合物(如酚类、萜类和含氮化合物等)
初生代谢物:生物生长生存所必需的代谢活动如糖类、脂质、蛋白质、核酸等
次生代谢物:不是生物生长所必需的,一般在特定的组织或器官中,并在一定条件下才进行。
红豆杉→紫杉醇
紫草→紫草宁
书P41 相关信息:
植物细胞工程的应用——细胞产物的工业化生产
细胞产物的工业化生产:利用植物细胞培养来获得目标产物。
植物细胞培养:在离体条件下对单个植物细胞或细胞团进行培养使其增殖的技术
①筛选出高产紫杉醇的细胞
②人参皂苷的生产
植物细胞工程的应用
育种方法 原理 过程 优点
快速繁殖 脱分化、再分化 保持优良品种的遗传特性
突变体 的利用 基因突变、 细胞的 ; 对愈伤组织进行诱变处理后再筛选 提高 ,获得优良性状
单倍体 育种 细胞的 、 ; 、 诱导染色体数目加倍 明显缩短————
植物体细 胞杂交 细胞膜的 、 细胞的 ; 融合、 杂种细胞组织培养 打破 ,
实现 。
细胞的全能性
全能性
突变率
全能性
染色体变异
先花药离体培养
再秋水仙素
育种年限
流动性
全能性
植物细胞
生殖隔离
远缘杂交
外植体
↓
愈伤组织
↓
胚状体
↓
试管苗
↓
植株
再分化
保持优良性状
快速大量繁殖
快速
繁殖
作物
脱毒
选择根尖
茎尖、芽尖
脱分化
选择花粉
培养
单倍体
纯合体
加倍
单倍体育种
化学物理因素诱导筛选
突变体利用
培养、提取
代谢产物
细胞产物的工厂化生产
③
①植物繁殖新途径
②作物新品种的培育
感谢观看
20XX