INCLUDEPICTURE "课后达标检测LLL.TIF" INCLUDEPICTURE "课后达标检测LLL.TIF" \* MERGEFORMAT
一、选择题
1.在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称作( )
A.鉴别培养基 B.加富培养基
C.选择培养基 D.基础培养基
解析:选C。选择培养基可以允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类的微生物生长。
2.下列有关稀释涂布平板法操作的叙述,错误的是( )
A.若稀释梯度以10倍为单位,当用移液管取1 mL原始菌液进行稀释时,试管内的无菌水应为9 mL
B.每次用灭菌后的移液管取菌液前,要先将菌液混匀
C.在涂布过程中,每次变换涂布的方向和位置时,应对涂布器进行灼烧灭菌
D.将菌液涂布在培养基表面时,为涂布均匀,应及时转动培养皿
解析:选C。稀释梯度以10倍为单位时,如果溶液总量为10 mL,需用移液管将1 mL原始菌液移入盛有9 mL无菌水的试管中,A正确;每次用灭菌后的移液管取菌液前,要先将菌液混匀,B正确;在涂布前,先将沾有少量酒精的涂布器在火焰上灼烧,待酒精燃尽后冷却8~10 s,用涂布器将菌液均匀涂布在培养基的表面,涂布结束后,应对涂布器进行灼烧灭菌,以防污染环境和感染操作者,C错误;涂布时,可转动培养皿,使菌液分布均匀,D正确。
3.稀释涂布平板法不仅是分离和纯化微生物的重要方法,也是测定微生物数量的重要方法。用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数,在统计数据时应( )
A.随机抽取某个稀释度的培养基,统计菌落数
B.将不同稀释度的3个培养基上的菌落数求和
C.将相同稀释度的全部培养基上的菌落进行计数
D.选择相同稀释度下菌落数为30~300的3个培养基进行计数后求平均值
解析:选D。用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数时,同一稀释度下,至少要涂布3个平板,确定培养基未被污染后,选择菌落数在30~300的平板进行计数,求其平均值,再通过计算得出土壤中的细菌数,D符合题意。
4.下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的叙述,正确的是( )
A.实验中采集的土样经高温灭菌后,可以用于制作土壤稀释液
B.分离土壤中能分解尿素的细菌时,应选择以尿素为唯一氮源的培养基
C.测定土壤样品中的活菌数目,常用显微镜直接计数法
D.接种土壤微生物稀释液时,平板划线法通过连续划线的操作使微生物均匀分布
解析:选B。分离土壤中分解尿素的细菌的实验中,采集的土样经高温灭菌后,土样中的微生物被杀死,再制作土壤稀释液接种并培养,不会得到菌落,A项错误;尿素分解菌能分解尿素,筛选能分解尿素的细菌时,应在以尿素为唯一氮源的选择培养基上培养,B项正确;测定土壤样品中的活菌数目,常用稀释涂布平板法,C项错误;接种土壤微生物稀释液时,稀释涂布平板法是通过涂布器的操作使微生物均匀分布,平板划线法不能使微生物均匀分布,D项错误。
5.在做“分离分解尿素的细菌”实验时,A同学从对应涂布106倍稀释液的培养基中筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落。下列有关叙述错误的是( )
A.A同学出现这种结果的原因只是土样不同
B.可以将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照,以检测培养基是否受到污染
C.让其他同学用与A同学一样的土壤进行实验,若结果与A同学一样,则可证明A同学无误
D.B选项的实验思路遵循了实验的对照原则,C选项也有对照实验
解析:选A。A同学出现这种结果的原因可能是土样不同,也可能是操作中被杂菌污染,A错误;A同学的实验结果可能是培养基受污染造成的,可以将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照,以检测培养基是否受到污染,B正确;让其他同学用与A同学一样的土壤进行实验,若结果与A同学一样,则可证明A同学无误,C正确;B选项的实验思路遵循了实验的对照原则,C选项也有对照实验,D正确。
6.微生物的接种方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法,下列关于两者区别的说法,正确的是( )
类别 平板划线法 稀释涂布平板法
① 需要接种环(灼烧灭菌) 需要涂布器(酒精消毒)
② 无需对菌液进行梯度稀释 对菌液进行系列梯度稀释
③ 能纯化微生物,不可计数 既能纯化微生物,又能计数
④ 最后的划线区域一定出现单菌落 稀释倍数足够大的菌液,涂布的平板才会出现单菌落
A.②④ B.③④
C.①④ D.②③
解析:选D。稀释涂布平板法用到的涂布器进行酒精浸泡消毒后要进行灼烧灭菌,①错误;平板划线法不需要对菌液进行梯度稀释,稀释涂布平板法需要对菌液进行系列梯度稀释,②正确;平板划线法不能用于计数,稀释涂布平板法可用于计数,③正确;如果划线操作不规范,平板划线法的最后划线区域不一定会出现单菌落,④错误。
7.下列关于分离分解尿素的细菌和分解纤维素的微生物的叙述,错误的是( )
A.可根据菌落的形状、大小和颜色等形态特征对某些分解尿素和纤维素的微生物进行鉴定
B.刚果红染色法可直接筛选纤维素分解菌,菌落周围透明圈越大,则分解能力越弱
C.用以尿素为唯一氮源的培养基筛选分解尿素的细菌,再加入酚红指示剂进一步鉴定
D.每隔24 h统计一次菌落数目,选取菌落数目稳定时的记录作为结果
解析:选B。刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物,当纤维素被纤维素分解菌分解后,刚果红—纤维素的复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。故用刚果红染色法可直接筛选纤维素分解菌,菌落周围透明圈越大,则分解纤维素的能力越强,B错误。
8.(2024·广东茂名高二检测)下列关于选择培养基的叙述,错误的是( )
A.选择培养基可允许特定种类的微生物在其上生长
B.制备选择培养基时,应根据所选微生物的特点确定培养基的配方
C.筛选能分解尿素的细菌时,应以尿素作为唯一的氮源
D.与普通培养基相比,选择培养基上生长的微生物的数量一般较多
解析:选D。普通培养基可满足多数微生物的生长需求,而选择培养基上只能生长特定种类的微生物,因此与普通培养基相比,选择培养基上生长的微生物的数量一般较少,D错误。
9.某生物兴趣小组完成了“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”的实验,具体操作流程如下图所示。下列相关叙述错误的是( )
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A.在酒精灯火焰附近称取土壤并将其倒入锥形瓶中
B.梯度稀释时可用移液管或微量移液器进行操作
C.振荡的目的是增加尿素分解菌的浓度
D.由图示菌落计数结果可知10 g土样中的菌株数约为3.2×107个
解析:选C。酒精灯火焰附近存在一个无菌区,在酒精灯火焰附近称取土壤并将其倒入锥形瓶中,可以防止称取的土壤在倒入锥形瓶过程中被污染,A正确;梯度稀释时可用移液管或微量移液器进行操作,B正确;振荡培养的目的是提高培养液的溶解氧的含量,使菌体充分接触培养液,提高营养物质的利用率,C错误;10 g土样中的菌株数约为3.2×107个,D正确。
10.下图是从土壤中分离能降解纤维素的微生物的实验过程流程图。下列有关叙述正确的是( )
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A.该实验所用的牛肉膏蛋白胨培养基中一定要添加适量的纤维素
B.过程①不能提高所选微生物在培养物中的比例
C.纯化经过③培养后获得的单细胞菌落属于群落层次
D.④的操作是挑取单菌落进行菌种鉴定并及时在皿底做上标记
解析:选D。由于该实验需从土壤中分离能降解纤维素的微生物,故所用培养基应以纤维素为唯一碳源,A错误;过程①是以纤维素为唯一碳源的培养基进行培养,可进一步提高能降解纤维素的微生物在培养物中的比例,B错误;纯化经过③培养后获得的单细胞菌落属于同一物种,属于种群层次,C错误;④的操作是挑取单菌落进行菌种鉴定并及时在皿底做上标记,D正确。
11.(2024·广东湛江高二期中)瘤胃中的微生物多为厌氧菌,某实验小组欲从牛的瘤胃中分离出能分解尿素的微生物,下图表示筛选流程,甲、乙、丙均为培养基。下列说法错误的是( )
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A.培养基上加石蜡的目的是隔绝外界的氧气
B.只有乙培养基上能形成肉眼可见的菌落
C.甲和丙培养基可以增加目的菌株的浓度
D.乙培养基是以尿素为唯一氮源的鉴别培养基
解析:选D。牛的瘤胃中的微生物多为厌氧菌,故培养基上加石蜡以隔绝外界氧气,创造无氧条件,A正确;只有乙培养基为固体培养基,即只有乙培养基上能形成肉眼可见的菌落,B正确;甲和丙培养基是液体培养基,可扩大培养菌种,增加目的菌株的浓度,C正确;乙培养基是以尿素为唯一氮源的选择培养基,D错误。
12.某同学探究检测大肠杆菌对抗生素的敏感性,实验操作规范。下图为37 ℃恒温箱中培养2 d后所见结果(①②③为加有抗生素的圆纸片)。下列叙述中错误的是( )
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A.①②透明圈的大小差异可能与抗生素种类不同有关
B.②③透明圈的大小差异可能与同种抗生素的浓度不同有关
C.①②③透明圈的大小差异可能与培养基中氮源含量不同有关
D.浸有无菌水的圆纸片在本实验中作为空白对照
解析:选C。抗生素的种类不同,抑菌效果不同,故①②透明圈的大小差异可能与抗生素种类不同有关,A正确;一般来说,抗生素的浓度越高抑菌效果越好,因此②③透明圈的大小差异可能与同种抗生素的浓度不同有关,B正确;同一平板的培养基中各处的含氮量是相同的,C错误;该实验中用浸有无菌水的圆纸片作为空白对照,D正确。
二、非选择题
13.下图甲、乙表示微生物接种常用的两种方法,请回答相关问题:
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(1)接种操作为什么一定要在火焰附近进行?
___________________________________________________________________。
(2)图甲是利用__________________________法进行微生物接种,图乙是利用__________________________法进行微生物接种。这两种方法所用的接种工具分别是_____________和_____________;对这两种接种工具进行灭菌的方法依次是________________________________________________________________。
(3)图丙是采用上述接种方法接种后培养的效果图解,其接种方法是图_____________(填“甲”或“乙”)所示的方法。
INCLUDEPICTURE "25SWX27.TIF" INCLUDEPICTURE "25SWX27.TIF" \* MERGEFORMAT INCLUDEPICTURE "25SWX28.TIF" INCLUDEPICTURE "25SWX28.TIF" \* MERGEFORMAT
(4)某小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,在第二次及以后划线时,总是从上一次划线的末端开始划线,这样做的目的是_________________________________________________________________________________________________________________________________________。
若得到图丁所示结果,在整个接种过程中,接种环至少需要灼烧_____________次。
解析:(1)由于在酒精灯火焰附近存在着无菌区域,因此接种常在火焰附近进行。(2)题图甲和题图乙表示的接种方法分别是平板划线法和稀释涂布平板法,这两种方法所用的接种工具分别是接种环和涂布器;对接种环和涂布器都可以用灼烧灭菌法进行灭菌处理。(3)分析题图丙可知,采用的接种方法是稀释涂布平板法,即题图乙所示的方法。(4)采用平板划线法分离细菌时,在第二次及以后的划线都要从上一次划线的末端开始,目的是将聚集的菌种逐步稀释,以便获得单菌落。题图丁共进行了3次划线,故需至少灼烧接种环4次。
答案:(1)火焰附近存在着无菌区域 (2)平板划线 稀释涂布平板 接种环 涂布器 灼烧灭菌、灼烧灭菌 (3)乙 (4)将聚集的菌种逐步稀释以便获得单菌落 4
14.某种在田间广泛使用的除草剂(含氮有机化合物)在土壤中不易降解,长期使用会污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能有效降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度一定,该除草剂的培养基不透明,培养皿中会残留少量无菌空气)。回答下列问题:
INCLUDEPICTURE "23-20.TIF" INCLUDEPICTURE "23-20.TIF" \* MERGEFORMAT
(1)制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行_____________处理。
(2)要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌,从物理性质、营养成分的角度要求上述培养基具备的特点是____________________________。若需要调节培养基pH,应该在各种成分都溶化后且分装_____________(填“前”或“后”)进行。
(3)图中形成的菌落中,无透明带菌落利用的氮源可能是_____________,有透明带菌落利用的氮源主要是该除草剂,据此可筛选出目的菌。
(4)若对活菌进行计数,常用的接种方法为________________________。为了测定微生物的数量,一位同学在4个平板培养基上分别接种稀释倍数为106的土壤样液0.1 mL,培养后菌落数目分别为155、160、176、149,则每毫升原土壤样液中上述微生物数量为_____________个。
解析:(1)制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行稀释处理。(2)要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌,从物理性质、营养成分的角度要求上述培养基具备的特点是以除草剂为唯一氮源的固体培养基。若需要调节培养基pH,应该在各种成分都溶化后且分装前进行。(3)根据题干“该除草剂的培养基不透明”可知,无透明带菌落利用的氮源并不是除草剂,而是空气中的N2,有透明带菌落利用的氮源为除草剂。(4)接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法,其中稀释涂布平板法还可用于对微生物进行计数。在4个平板培养基上分别接种稀释倍数为106的土壤样液0.1 mL,培养后菌落数目分别为155、160、176、149,则每毫升原土壤样液中上述微生物数量为(155+160+176+149)÷4÷0.1×106=1.6×109(个)。
答案:(1)稀释 (2)以除草剂为唯一氮源的固体培养基 前 (3)N2 (4)稀释涂布平板法 1.6×109
15.(2022·广东选择考)研究深海独特的生态环境对于开发海洋资源具有重要意义。近期在“科学号”海洋科考船对中国南海科考中,中国科学家采集了某海域1 146 米深海冷泉附近沉积物样品,分离、鉴定得到新的微生物菌株并进一步研究了其生物学特性。回答下列问题。
INCLUDEPICTURE "25SWX29.TIF" INCLUDEPICTURE "25SWX29.TIF" \* MERGEFORMAT
(1)研究者先制备富集培养基,然后采用__________________________法灭菌,冷却后再接入沉积物样品,28 ℃厌氧培养一段时间后,获得了含拟杆菌的混合培养物,为了获得纯种培养,除了稀释涂布平板法,还可采用_____________ 法。据图分析,拟杆菌新菌株在以_____________为碳源时生长状况最好。
(2)研究发现,将采集的样品置于各种培养基中培养,仍有很多微生物不能被分离筛选出来,推测其原因可能是______________________。(答一点即可)
(3)藻类细胞解体后的难降解多糖物质,通常会聚集成碎屑沉降到深海底部。从生态系统组成成分的角度考虑,拟杆菌对深海生态系统碳循环的作用可能是_________________________________________________________________________________________________________________________________________。
(4)深海冷泉环境特殊,推测此环境下生存的拟杆菌所分泌的各种多糖降解酶,除具有酶的一般共性外,其特性可能还有_____________________________。
解析:(1)培养基通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。要获得纯净培养物,可以采用稀释涂布平板法或平板划线法,将单个微生物分散在固体培养基上,经过培养得到单菌落。在以纤维素为碳源的培养基中,细胞数量最多,可推知拟杆菌新菌株在以纤维素为碳源时生长状况最好。(2)深海冷泉中的某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物质才能生存(或需要在深海冷泉的特定环境中才能存活等),故将采集的样品置于各种培养基中培养,仍有很多微生物不能被分离筛选出来。(3)拟杆菌为异养生物,作为该生态系统的分解者,能将沉降到深海底部的难降解多糖物质分解为无机物,归还到无机环境中,有利于碳循环的顺利进行。(4)深海冷泉温度较低,故生活在其中的拟杆菌所分泌的各种多糖降解酶应具有耐低温的特性才能高效降解多糖,保证拟杆菌的正常生命活动所需。
答案:(1)高压蒸汽灭菌 平板划线 纤维素
(2)某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物质才能生存(或需要在深海冷泉的特定环境中才能存活) (3)拟杆菌作为分解者,将沉降到深海底部的难降解多糖物质分解为无机物,归还到无机环境中,有利于碳循环的顺利进行 (4)耐低温