人教版（2019）高中生物选择性必修三 3.2.3 DNA片段的扩增和电泳鉴定 教案（表格式）
文档属性
| 名称 | 人教版（2019）高中生物选择性必修三 3.2.3 DNA片段的扩增和电泳鉴定 教案（表格式） |
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| 格式 | docx | ||
| 文件大小 | 84.2KB | ||
| 资源类型 | 教案 | ||
| 版本资源 | 人教版（2019） | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2026-02-24 00:00:00 | ||
图片预览
文档简介
课题 DNA片段的扩增及电泳鉴定
教学目标
1.说出琼脂糖凝胶电泳的原理，进行琼脂糖凝胶电泳的基本操作。 2.掌握利用PCR和电泳技术鉴定转基因作物基本流程。 3.PCR检测为市场准入提供技术支撑，通过检测标签真实性，理解科技在保障食品安全中的作用。
教学重点： 1. PCR技术。
2.琼脂糖凝胶电泳技术的操作 。
教学难点： 1. PCR和琼脂糖凝胶电泳技术的操作。
2. 分析琼脂糖凝胶电泳技术的的结果。
教学过程
一、情境引入 1.教师活动：介绍转基因大豆MON89788，提出转基因大豆的安全争议，需要用到转基因鉴定技术。 2.学生活动：了解转基因大豆，思考转基因作物的鉴定技术。 3.设计意图：由转基因食品安全问题引出转基因作物鉴定技术。 二、实验设计 （一）鉴定大豆是否为抗除草剂大豆MON89788的流程 提取大豆DNA PCR扩增目的基因（MON89788） 电泳鉴定 （二）设置对照 1.如果出现扩增产物，我们如何知道产物就是MON89788？如果没有出现扩增产物，又如何确保结果是可信的，而不是实验操作过程中出现问题导致没有产物出现 2.设置对照 组别实验组阳性对照阴性对照样品待测大豆MON89788标准质粒普通大豆结果
说明：若出现扩增产物，结果出记为“+”,未出现记为“-”。 三、进行实验 （一）PCR扩增目的基因 1.分别待测大豆DNA，MON89788标准质粒和普通大豆的DNA进行PCR扩增。 （1）按下表加入各组分 材料用量2× Det PCR MasterMix10μL正向引物(10μM)0.5μL反向引物(10μM)0.5μL模板DNA （用量为1pg-1μg）1μLddH2O补至20μL
（2）在PCR仪中设定程序 循环程序变性复性延伸预变性94℃,3min35循环94℃,30s55℃,30s72℃,1min终延伸72℃,5min
（二）琼脂糖凝胶电泳鉴定DNA 1.琼脂糖凝胶电泳的原理是什么？ 原理：DNA分子在中性条件下会带负电，在电场的作用下，DNA会朝着正极移动。DNA分子在凝胶中的迁移速率与DNA分子的大小和构象有关，DNA分子的碱基越少，迁移的速度越快。凝胶中的DNA分子可以通过染色，在紫外灯下被检测出来。 2.制作琼脂糖凝胶： （1）称琼脂0.3g，倒入锥形瓶中。 （2）向锥形瓶中倒入加入了核酸染料的TAE30ml,放入微波炉加热 1 min 。 （3）组装制胶槽。 （4）倒胶，静置20min。 3.电泳： （1）组装电泳槽：电泳槽中放入足量的TAE，将凝固的琼脂糖凝胶放入电泳槽中，点样孔一端放在负极（黑色端） （2）点样，吸取样品20μL，分别打入相应的点样孔内。共4个样品，分别是Mark，阳性对照，阴性对照和待测大豆。 （3）跑胶，链接电源，开始电泳，观察指示剂的位置变化。（30min左右） 3.观察，记录结果。 （1）将凝胶放在观察室，观察电泳情况。 （2）将结果记录在以下表格中。 组别实验组阳性对照阴性对照样品待测大豆MON89788标准质粒普通大豆结果
说明：若出现扩增产物，结果出记为“+”,未出现记为“-”。 （3）在下图中画出观察结果。 说明：MON89788基因长度为139bp 四、分析结果，得出结论： 1.样品大豆是否为转基因大豆？ 2.根据对照组的现象判断，实验结果是否可信？？ 3. 联系电泳的原理，出现的产物一定是MON89788吗？ 4. 如果电泳出现了不止一个条带，可能是什么原因？ 五、板书设计 六、教学反思： 1.教师主导，学生主体：教师通过提出问题的方式，引导学生完成实验设计，进行实验操作，分析实验结果，得出实验结论，课堂体现了学生为主体的教学理念。 2.教学过程重实践：学生通过实践操作，体会PCR技术和电泳技术的原理，掌握两项技术的基本操作。
教学目标
1.说出琼脂糖凝胶电泳的原理，进行琼脂糖凝胶电泳的基本操作。 2.掌握利用PCR和电泳技术鉴定转基因作物基本流程。 3.PCR检测为市场准入提供技术支撑，通过检测标签真实性，理解科技在保障食品安全中的作用。
教学重点： 1. PCR技术。
2.琼脂糖凝胶电泳技术的操作 。
教学难点： 1. PCR和琼脂糖凝胶电泳技术的操作。
2. 分析琼脂糖凝胶电泳技术的的结果。
教学过程
一、情境引入 1.教师活动：介绍转基因大豆MON89788，提出转基因大豆的安全争议，需要用到转基因鉴定技术。 2.学生活动：了解转基因大豆，思考转基因作物的鉴定技术。 3.设计意图：由转基因食品安全问题引出转基因作物鉴定技术。 二、实验设计 （一）鉴定大豆是否为抗除草剂大豆MON89788的流程 提取大豆DNA PCR扩增目的基因（MON89788） 电泳鉴定 （二）设置对照 1.如果出现扩增产物，我们如何知道产物就是MON89788？如果没有出现扩增产物，又如何确保结果是可信的，而不是实验操作过程中出现问题导致没有产物出现 2.设置对照 组别实验组阳性对照阴性对照样品待测大豆MON89788标准质粒普通大豆结果
说明：若出现扩增产物，结果出记为“+”,未出现记为“-”。 三、进行实验 （一）PCR扩增目的基因 1.分别待测大豆DNA，MON89788标准质粒和普通大豆的DNA进行PCR扩增。 （1）按下表加入各组分 材料用量2× Det PCR MasterMix10μL正向引物(10μM)0.5μL反向引物(10μM)0.5μL模板DNA （用量为1pg-1μg）1μLddH2O补至20μL
（2）在PCR仪中设定程序 循环程序变性复性延伸预变性94℃,3min35循环94℃,30s55℃,30s72℃,1min终延伸72℃,5min
（二）琼脂糖凝胶电泳鉴定DNA 1.琼脂糖凝胶电泳的原理是什么？ 原理：DNA分子在中性条件下会带负电，在电场的作用下，DNA会朝着正极移动。DNA分子在凝胶中的迁移速率与DNA分子的大小和构象有关，DNA分子的碱基越少，迁移的速度越快。凝胶中的DNA分子可以通过染色，在紫外灯下被检测出来。 2.制作琼脂糖凝胶： （1）称琼脂0.3g，倒入锥形瓶中。 （2）向锥形瓶中倒入加入了核酸染料的TAE30ml,放入微波炉加热 1 min 。 （3）组装制胶槽。 （4）倒胶，静置20min。 3.电泳： （1）组装电泳槽：电泳槽中放入足量的TAE，将凝固的琼脂糖凝胶放入电泳槽中，点样孔一端放在负极（黑色端） （2）点样，吸取样品20μL，分别打入相应的点样孔内。共4个样品，分别是Mark，阳性对照，阴性对照和待测大豆。 （3）跑胶，链接电源，开始电泳，观察指示剂的位置变化。（30min左右） 3.观察，记录结果。 （1）将凝胶放在观察室，观察电泳情况。 （2）将结果记录在以下表格中。 组别实验组阳性对照阴性对照样品待测大豆MON89788标准质粒普通大豆结果
说明：若出现扩增产物，结果出记为“+”,未出现记为“-”。 （3）在下图中画出观察结果。 说明：MON89788基因长度为139bp 四、分析结果，得出结论： 1.样品大豆是否为转基因大豆？ 2.根据对照组的现象判断，实验结果是否可信？？ 3. 联系电泳的原理，出现的产物一定是MON89788吗？ 4. 如果电泳出现了不止一个条带，可能是什么原因？ 五、板书设计 六、教学反思： 1.教师主导，学生主体：教师通过提出问题的方式，引导学生完成实验设计，进行实验操作，分析实验结果，得出实验结论，课堂体现了学生为主体的教学理念。 2.教学过程重实践：学生通过实践操作，体会PCR技术和电泳技术的原理，掌握两项技术的基本操作。