第一章 无菌操作技术实践
第一节 微生物的分离和培养
1.不同的微生物对营养物质的需求各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的微生物营养的描述中,不正确的是( )
A.氮源物质为该微生物提供必要的氮素
B.碳源物质也是该微生物的能源物质
C.无机盐是该微生物不可缺少的营养物质
D.水是该微生物的营养要素之一
解析:以CO2为唯一碳源可知该微生物为自养型微生物,可以利用CO2合成有机物,该无机碳源不能为微生物提供能量。
答案:B
2.
右图是微生物平板划线示意图,划线的顺序为1→2→3→4→5。下列操作方法正确的是( )
A.只有操作前要将接种环放在火焰上灼烧灭菌
B.划线操作须在火焰上进行
C.在5区域中才可以得到所需菌落
D.在1→2→3→4→5区域中划线前后都要对接种环进行灭菌
解析:本题考查微生物培养过程中常用的方法之一,即平板划线法。操作的前后都要对接种环进行灭菌;划线操作须在火焰旁进行,而不是在火焰上;所有的划线区都有可能得到所需菌落,只是5区的菌落纯度相对较高。
答案:D
3.不同培养基的具体配方不同,但一般都含有( )
A.碳源、磷酸盐和维生素
B.氮源和维生素
C.水、碳源、氮源和无机盐
D.碳元素、氧元素、氢元素、氮元素
解析:培养基中的水、无机盐、碳源和氮源是微生物生长繁殖所必需的营养物质。
答案:C
4.下列关于斜面接种操作正确的是( )
A.使用已灭菌的接种环、培养皿,在操作过程中不再灭菌
B.打开含菌种的试管,需通过火焰,取出菌种后,不需通过火焰
C.将带有菌种的接种环迅速伸入待接种的试管中,划3~5条平行线即可
D.将接种过菌种的试管,放在恒温箱中培养
答案:D
5.倒平板时需将培养基冷却至( )
A.室温
B.0 ℃左右
C.50 ℃左右
D.100 ℃左右
答案:C
6.检验培养基是否有杂菌污染的最有效方法是( )
A.将未接种的培养基放在实验桌上培养
B.将未接种的培养基放在窗台上培养
C.将未接种的培养基放在恒温箱中培养
D.将已接种的培养基放在恒温箱中培养
解析:检验培养基有没有被杂菌污染,可选取未接种的培养基与接种样品的培养基同时在恒温箱中培养。如果在培养过程中未接种的培养基没有菌落生长,说明培养基没有被杂菌污染;若未接种的培养基有菌落生长,说明培养基被杂菌污染。
答案:C
7.关于灭菌和消毒的不正确理解是( )
A.灭菌是指杀灭环境中的一切微生物,包括芽孢和孢子
B.消毒和灭菌实质上是完全相同的
C.接种环用灼烧法灭菌
D.常用灭菌方法有灼烧法、干热灭菌法、湿热灭菌法
解析:消毒是使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子),灭菌则是用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。
答案:B
8.下列叙述错误的是( )
A.在实验室中,切不可吃东西、喝水
B.离开实验室时不一定要洗手
C.进行实验操作前一定要对双手消毒
D.使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌
解析:在实验室中,切不可吃东西、喝水;离开实验室时一定要洗手,以防止微生物感染;进行实验操作前,操作者的衣着和手一定要清洁和消毒;使用后的培养基一定要进行灭菌处理。
答案:B
9.有关倒平板的操作错误的是( )
A.将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上
B.使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰
C.将培养皿打开,培养皿盖倒放在桌子上
D.等待平板冷却凝固后需要倒过来放置
解析:倒平板的操作过程中,培养皿盖始终不能离开培养皿。
答案:C
10.在接种操作过程中,常用的工具不包括( )
A.玻璃刮铲 B.接种针
C.接种环 D.镊子
答案:D
11.某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察、计数。请回答与此实验相关的问题。
(1)培养基中含有的淀粉为细菌的培养提供了 。除此之外,培养基还必须含有的基本成分是 、?
和 。?
(2)对培养基进行灭菌,一般采用的方法是 。?
(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果,应将接种了湖水样品的平板置于 中培养,培养的温度设定在37 ℃。要使该实验所得结果可靠,还应该同时在另一平板上接种无菌水作为 。?
(4)培养20 h后,观察到平板上有形态和颜色不同的菌落,这说明湖水样品中有 种细菌。一般来说,菌落总数越多,湖水遭受细菌污染的程度越 。?
解析:用于培养微生物的培养基中,一般含有微生物所需要的碳源、氮源、水和无机盐等成分,碳源、氮源一般分别由糖类和蛋白质类物质提供。对培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法。在检测湖水中细菌的污染情况时,应设置对照实验,才能得出可靠的结果。
答案:(1)碳源 氮源 无机盐 水
(2)高压蒸汽灭菌
(3)恒温培养箱 对照
(4)多 大
12.
下列是有关微生物的培养与应用的问题,请分析回答下列问题。
(1)图中是利用 法进行微生物接种。为达到这一目的,操作上应注意 ?
。(答出一点即可)?
(2)菌落形成的根本原因是 ;将乳酸菌接种到彻底灭菌的固体培养基上,要使其正常生长必须给予的条件是 。?
(3)下表是一种培养基配方,请回答下列问题。
成分 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4· 7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂
含量 1.4 g 2.1 g 0.2 g 10.0 g 1.0 g 15.0 g
①该培养基的葡萄糖为微生物的生长繁殖主要提供
。?
②如果要对培养基的菌落进行纯化,在培养基上划线操作中,操作的第一步及每次划线之前都要灼烧接种环,目的是对接种环进行 。?
解析:(1)根据图示是平板划线法。每次划线前要灼烧接种环;冷却后从上一区划线末端开始划;首尾区不重叠等。
(2)由于细菌不断繁殖,形成的群体即菌落。在培养基中加入相应的物质制成选择培养基,可使需要的微生物大量繁殖。乳酸菌是厌氧菌,要隔绝空气。
(3)葡萄糖是微生物的能源物质,还提供碳源。接种环进行灼烧,避免接种环上可能存在的微生物污染培养基。
答案:(1)平板划线 ①每次划线前要灼烧接种环;②冷却后从上一区划线末端开始划;③首尾区不重叠(答出其中一点即可)
(2)子细胞成为群体 隔绝空气
(3)①碳源和能源 ②灭菌
3
(共34张PPT)
第一章 无菌操作技术实践
第一节 微生物的分离和培养
一
二
三
四
一
二
三
四
一
二
三
四
一
二
三
四
探究点一
探究点二
探究点三
探究点四
探究点一
探究点二
探究点三
探究点四
探究点一
探究点二
探究点三
探究点四
探究点一
探究点二
探究点三
探究点四
探究点一
探究点二
探究点三
探究点四
探究点一
探究点二
探究点三
探究点四
探究点一
探究点二
探究点三
探究点四
探究点一
探究点二
探究点三
探究点四
探究点一
探究点二
探究点三
探究点四
探究点一
探究点二
探究点三
探究点四
探究点一
探究点二
探究点三
探究点四
探究点一
探究点二
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探究点一
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探究点一
探究点二
探究点三
探究点四
探究点一
探究点二
探究点三
探究点四
探究点一
探究点二
探究点三
探究点四
探究点一
探究点二
探究点三
探究点四
探究点一
探究点二
探究点三
探究点四
探究点一
探究点二
探究点三
探究点四
探究点一
探究点二
探究点三
探究点四
1 2 3 4 5 6
1 2 3 4 5 6
1 2 3 4 5 6
1 2 3 4 5 6
1 2 3 4 5 6
1 2 3 4 5 6
1 2 3 4 5 6
第二节 分离特定的微生物并测定其数量
1.含氨苄青霉素的LB培养基在基因工程中有很重要的应用。该培养基能杀死一切不抗氨苄青霉素的细菌,只有对氨苄青霉素具有抗性的细菌才能正常生长繁殖。由其作用可知该培养基是一种( )
A.固体培养基 B.合成培养基
C.天然培养基 D.选择培养基
解析:该培养基由于含有氨苄青霉素,能杀死一切不抗氨苄青霉素的细菌,只有对氨苄青霉素具有抗性的细菌才能正常生长繁殖。因此氨苄青霉素起到了选择作用。
答案:D
2.产生标准菌落的细菌的最初数目和培养基分别是( )
A.一个细菌,液体培养基
B.许多细菌,液体培养基
C.一个细菌,固体培养基
D.许多细菌,固体培养基
解析:菌落是由一个细菌繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,因此标准菌落应来源于最初的一个细菌。产生菌落的培养基是固体培养基。
答案:C
3.用来判断选择培养基是否起到了选择作用,需要设置的对照是( )
A.未接种的选择培养基
B.未接种的牛肉膏蛋白胨培养基
C.接种了的牛肉膏蛋白胨培养基
D.接种了的选择培养基
解析:将菌液稀释相同的倍数,在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上生长的菌落数目,因此,用牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。对照遵循的原则是单一变量原则,所以与选择培养基一样,应进行接种培养。
答案:C
4.涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法。下列相关叙述错误的是( )
A.操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释
B.需将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基表面
C.不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落
D.操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理
解析:若菌液浓度过大,形成的菌落连在一起,得不到单个的菌落。
答案:C
5.用涂布平板法来统计样品中的活菌数时,通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数。原因是( )
A.平板上的一个菌落就是一个细菌
B.菌落中的细菌数是固定的
C.此时的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌
D.此方法统计的菌落数一定与活菌的实际数相同
解析:用涂布平板法来统计样品中的活菌数时,由于待测样品往往不易完全分散成单个个体,长成的一个菌落,也有可能来源于样品中的2~3个或更多个个体,因此涂布平板菌落计数法计数的结果与待测样品中真正的含菌数量相比往往偏低。
答案:C
6.在加入刚果红的培养基中出现透明圈的菌落是( )
A.分解尿素的细菌 B.硝化细菌
C.分解纤维素的细菌 D.乳酸菌
解析:分解纤维素的细菌能将纤维素分解,则刚果红—纤维素的复合物就无法形成,培养基中就会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。
答案:C
7.从土壤中分离能分解尿素的微生物、分离能分解纤维素的微生物时,所利用的培养基中最明显的特点是( )
A.前者尿素是唯一的氮源,后者纤维素是唯一的碳源
B.二者都具有琼脂成分
C.二者的pH相同
D.以上均不正确
解析:由于分离微生物所利用的是选择培养基,所以培养基中有与其他培养基不同的某种成分,该种成分是由培养的目的微生物而定的。分离能分解尿素的微生物,所利用的培养基中尿素是唯一的氮源,凡是能分解尿素的微生物就能生存,否则就不能生存。由相同的原理可知,分离能分解纤维素的微生物时,纤维素是唯一的碳源。
答案:A
8.在105倍稀释液中,现与初始菌液相比,大肠杆菌的数目是( )
A.105个大肠杆菌 B.是初始菌液的105倍
C.是初始菌液的10-5 D.大于初始菌液的10-5
解析:105倍稀释液已经经过5次稀释,每稀释一次得到的稀释液浓度是上一次的1/10,因此选C项。
答案:C
9.分离纤维素分解菌时,称取土样20 g,在无菌条件下加入纤维素粉为唯一碳源,将锥形瓶固定在摇床上,在一定温度下振荡培养1~2 d,直至培养液变浑浊。由此推论,纤维素分解菌代谢类型是( )
A.自养需氧 B.自养厌氧
C.异养需氧 D.异养厌氧
解析:以纤维素粉为唯一碳源说明是异养型;振荡培养为了增加溶氧,说明是需氧型。
答案:C
10.(2014·课标全国高考理综Ⅰ改编)植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题。
(1)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时,CR可与纤维素形成 色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的 。?
(2)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表):
酵母 膏 无机 盐 淀粉 纤维 素粉 琼脂 CR 溶液 水
培养 基甲 + + + + - + +
培养 基乙 + + + - + + +
注:“+”表示有,“-”表示无。
据表判断,培养基甲 (填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是 ;培养基乙 (填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是 。?
解析:本题考查微生物的分离与培养。
(1)CR可与纤维素形成红色复合物。用含有CR的培养基培养纤维素分解菌时,菌落存在部位纤维素被分解,不会形成红色复合物,因此培养基上会出现以该菌落为中心的透明圈。
(2)培养基甲中有淀粉,纤维素不是唯一的碳源,且无琼脂,是液体培养基,不能用于分离和鉴别纤维素分解菌。培养基乙中无纤维素粉,即使出现单菌落,也不能确定为纤维素分解菌,所以不能用于分离和鉴别纤维素分解菌。
答案:(1)红 透明圈
(2)不能 液体培养基不能用于分离单菌落 不能
培养基中没有纤维素,不会形成CR纤维素红色复合物,即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌
11.为了探究土壤中的微生物对尿素是否有分解作用,设计了以下实验,并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如下表所示,实验步骤如下图所示。请分析回答问题。
KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4· 7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂
1.4 g 2.1 g 0.2 g 1 g 10 g 15 g
将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL
(1)培养基中加入尿素的目的是筛选 ,这种培养基属于 培养基。?
(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的 和 ,实验中需要振荡培养,原因是 ?
。?
(3)转入固体培养基时,常采用 接种,获得单菌落后继续筛选。?
(4)在进行分离分解尿素的细菌的实验时,A同学从培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只筛选出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有 。(填序号)?
①土样不同 ②培养基污染 ③操作失误 ④没有设置对照
(5)实验结束后,使用过的培养基应该进行 处理后,才能倒掉。?
解析:尿素是培养基中的唯一氮源,因此原则上只有能够利用尿素的微生物才能够在此培养基上生长,这种培养基属于选择培养基,可筛选目的菌。目的菌生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的尿素和葡萄糖。振荡培养的目的是提供氧。固体培养基培养时的接种方法常用涂布平板法或平板划线法。土样不同、培养基污染、操作失误均可能导致计数误差。倒掉培养基之前应对其进行灭菌处理。
答案:(1)目的菌 选择
(2)尿素 葡萄糖 为目的菌提供氧气
(3)涂布平板法(或平板划线法)
(4)①②③
(5)灭菌
12.某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌,设计实验步骤如下,请给予合理的补充。
(1)采样与培养:将采集的土样混匀后称取1 g,置于经过 法灭菌处理的液体培养基中,28 ℃振荡培养。?
(2)接种与选择:为避免培养液中菌体浓度过高,需将培养液进行 处理。之后,将菌液涂布接种于以 为唯一碳源的固体培养基上,30 ℃条件下培养。为避免污染,需将培养皿呈 状态放置。此外,为排除其他因素的影响,提高实验可信度,本步骤需设计 作为空白对照。?
(3)筛选与纯化:将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围,如果菌落周围的现象是 ,则说明此种菌能够 。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株,采用 法接种于新的培养基平板,可对菌株进行进一步的纯化。?
解析:微生物培养的培养基要用高压蒸汽灭菌处理。为避免培养液中菌体浓度过高,需将培养液进行稀释。接种到以淀粉为碳源的选择培养基上,能利用淀粉的微生物才能生长,可用未接种的空白培养基作对照。微生物利用淀粉后,以微生物为中心的周围无淀粉,加入碘液不变蓝,出现透明圈。进一步纯化一般用平板划线法。
答案:(1)高压蒸汽灭菌
(2)系列稀释(或“梯度稀释”) 淀粉 倒置 未接种的空白培养基(或接种等量无菌水的培养基)
(3)出现透明圈 分泌淀粉酶使淀粉发生水解 (平板)划线
13.(2014·课标全国高考理综Ⅱ)为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌分离等工作。回答下列问题。
(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是 ;然后,将1 mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为 。?
(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过 灭菌,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是 。?
(3)示意图A和B中, 表示的是用涂布平板法接种培养后得到的结果。?
(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液中 的含量,同时可使菌体与培养液充分接触,提高 的利用率。?
解析:为了检测培养基灭菌平板是否合格,应对空白平板先行培养一段时间。每升水样中的活菌数为(39+38+37)÷3÷0.1×100×1 000=3.8×107(个)。对接种环应进行灼烧灭菌。为了将聚集的菌体逐步稀释以获得单个菌落,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。A表示的是平板划线法接种培养后得到的结果,B表示的是用稀释涂布平板法接种后得到的结果。
答案:(1)检测培养基平板灭菌是否合格 3.8×107
(2)灼烧 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落
(3)B
(4)溶解氧 营养物质
5
(共25张PPT)
第二节 分离特定的微生物并测定其数量
一
二
三
一
二
三
一
二
三
探究点一
探究点二
探究点一
探究点二
探究点一
探究点二
探究点一
探究点二
探究点一
探究点二
探究点一
探究点二
探究点一
探究点二
探究点一
探究点二
探究点一
探究点二
探究点一
探究点二
探究点一
探究点二
探究点一
探究点二
探究点一
探究点二
1 2 3 4 5 6
1 2 3 4 5 6
1 2 3 4 5 6
1 2 3 4 5 6
1 2 3 4 5 6
1 2 3 4 5 6
1 2 3 4 5 6
CoTE
第三节 植物组织培养技术
1.植物细胞表现出全能性的必要条件是( )
A.导入其他植物细胞的基因
B.将成熟的细胞核移植到去核的卵细胞中
C.用适当浓度的秋水仙素处理
D.脱离母体后,给予适宜的营养和适宜的温度等外界条件
解析:植物细胞只有脱离了植物体,在一定的外部因素作用下,经过细胞分裂形成愈伤组织,才能表现出全能性,由愈伤组织细胞发育、分化出新的植物体。
答案:D
2.把胡萝卜单个韧皮部细胞接种到配制的培养基上培养,获得了许多完整的植株,这些植株( )
A.变异频率较高 B.都是单倍体
C.彼此性状极其相似 D.都是纯合子
解析:植物组织培养属于无性繁殖方式,由同一个胡萝卜韧皮部细胞培育而来的许多植株,遗传物质均相同,故其性状极为相似。
答案:C
3.甘薯种植多年后易积累病毒而导致品种退化。目前生产上采用茎尖分生组织离体培养的方法快速繁殖脱毒的种苗,以保证该品种的品质和产量水平。这种通过分生组织离体培养获得种苗的过程涉及细胞的( )
①有丝分裂 ②分化 ③减数分裂 ④全能性
A.①②③ B.②③④
C.①③④ D.①②④
解析:某些作物进行无性繁殖过程中会感染病毒且容易传给后代,病毒逐年积累就会导致作物产量降低,品质变差。切取一定大小的茎尖进行组织培养,再生的植株就有可能不带病毒,从而获得脱毒苗。在这个过程中通过细胞的有丝分裂增加细胞的数目,通过细胞的分化使来自同一细胞的这些细胞功能发生差异,完成生物体的各项生命活动。
答案:D
4.下列对愈伤组织的叙述,不正确的是( )
A.由已经分化的植物细胞或组织产生
B.是失去分裂能力、高度分化的一群细胞
C.既有分裂能力又有分化能力的一群细胞
D.具有发育成一个完整植物体的潜能
解析:离体的植物器官、组织或细胞,在培养了一段时间以后,会通过细胞分裂形成愈伤组织。愈伤组织在有关激素的作用下,能分裂、分化形成新的植物体。
答案:B
5.下表是植物组织培养时,相关激素的使用情况及实验结果。下列叙述错误的是( )
激素使用情况 实验结果
先使用生长素,后使用细胞分裂素 有利于细胞分裂,但细胞不分化
先使用细胞分裂素,后使用生长素 细胞既分裂也分化
同时使用,且用量相当 促进愈伤组织的形成
同时使用,且生长素用量较高 有利于根的分化、抑制芽的形成
同时使用,且细胞分裂素用量较高 有利于芽的分化、抑制根的形成
A.从表中信息可知,不同激素的使用顺序影响植物细胞的发育方向
B.从表中信息可知,不同激素用量比例影响植物细胞的发育方向
C.在植物组织培养中,生长素的主要作用是促进细胞的生长、分裂和分化
D.在生长素存在的情况下,细胞分裂素的作用呈现减弱趋势
解析:如先使用生长素,后使用细胞分裂素,则有利于细胞的分裂,但细胞不分化,表明在生长素存在的情况下,细胞分裂素的作用呈现加强趋势,D项错误。
答案:D
6.植物组织培养的再分化与细胞自然分化的不同点是( )
A.前者细胞的形态结构没有变化,后者细胞的形态结构有变化
B.前者细胞的形态结构有变化,后者细胞的形态结构没有变化
C.前者有植物激素的调节,后者没有植物激素的调节
D.前者植物激素主要来源于培养基,后者植物激素来源于植物体自身
解析:再分化的本质也是细胞分化,和细胞自然分化都是基因选择性表达的结果,都会造成细胞形态、结构、功能的改变,都离不开植物激素的调节。再分化所需的激素主要由培养基提供,而自然分化所需的激素来自植物体自身。
答案:D
7.在制备MS基本培养基的过程中,错误的是( )
①在使用提前配制的母液时,可直接用移液管从母液中取 ②要制备诱导愈伤组织生成的培养基、生芽培养基和生根培养基 ③配制培养基时,琼脂要及早加热熔化
④MS培养基的pH要求不太严格,可控制在5~7之间
A.①② B.③④
C.①④ D.②③
解析:在使用提前配制的母液时,应在量取各种母液之前轻轻摇动盛放的瓶子,如发现瓶中有沉淀、悬浮物或被微生物污染,应重新配制。MS培养基的pH过酸或过碱都对植物材料有很大的影响,所以pH应控制在5.6~5.8之间。
答案:C
8.在天竺葵的组织培养操作完成3~4 d后,观察同一温室中的外植体,发现有的瓶内外植体正常生长,有的瓶内外植体死亡,你认为外植体死亡的原因不可能是( )
A.培养条件,比如光照、温度等不适宜
B.接种时外植体未灭菌
C.接种工具灼烧后未待冷却就接种外植体
D.将外植体倒插入培养基中
解析:同一温室提供了相同的光照和温度,但有的瓶内外植体正常生长,有的瓶内外植体却死亡,说明外植体死亡的原因不可能是光照、温度等培养条件不适宜。
答案:A
9.用天竺葵的幼叶进行植物组织培养可培育出试管苗。下面关于这一过程的说法正确的是( )
A.进行培养时,一次性加足营养物质以防止污染
B.生成愈伤组织之前整个培养过程应在暗处进行
C.要根据培养过程的实际情况,更换培养基
D.将愈伤组织转接到生根培养基上,待生根后再转接到生芽培养基上
解析:一次性加足营养物质会导致渗透压过高,外植体失水死亡。天竺葵整个培养过程都要见光培养。培养中要根据培养过程的实际情况,更换培养基,外植体先接种到诱导愈伤组织生成的培养基,然后将愈伤组织转接到生芽培养基上,待生芽后再转接到生根培养基上。
答案:C
10.关于天竺葵组织培养的操作,下列说法不正确的是( )
A.培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌
B.幼苗要先移植到消过毒的蛭石或者珍珠岩等环境下生活一段时间
C.用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长,一旦感染杂菌则前功尽弃
D.嫩叶消毒后要用自来水多次冲洗
解析:天竺葵的组织培养中为防止杂菌污染,需要进行严格的无菌操作,外植体要消毒,培养基及其他器械要灭菌。幼苗要先移植到消过毒的环境中生活一段时间,然后再栽培到土壤中。嫩叶消毒后要用无菌水冲洗,自来水可能含有杂菌。
答案:D
11.无菌技术是植物组织培养能否获得成功的关键,以下说法正确的是( )
①由于植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗逆性差,所以对无菌操作的要求非常严格
②对培养基及器械用高压蒸汽灭菌
③对培养材料进行表面消毒时,一方面要考虑药剂的消毒效果,另一方面还要考虑植物材料的耐受能力
④不同药剂、不同植物材料甚至不同器官要区别对待
⑤对培养材料可用高压蒸汽灭菌
⑥如果不小心导致污染,将可能造成培养工作的前功尽弃
A.①②③④⑤
B.①②③④
C.①②③④⑥
D.①②③④⑤⑥
解析:无菌操作是植物组织培养技术的关键,如果灭菌不好就会导致整个培养工作的失败。对于整个操作过程中的凡是和植物组织接触的材料、用具和试剂都要进行灭菌消毒。但不同的用具、材料要用不同的方法,如培养基的灭菌用高压蒸汽灭菌法,而植物组织用消毒液进行消毒而不能用高压蒸汽灭菌。
答案:D
12.下图是用胡萝卜根细胞进行组织培养的某些过程示意图。请据图回答下列问题。
(1)把组织培养的过程按正确顺序排列 (用字母表示)。?
(2)实验前试管和培养基应经 处理。?
(3)培养基中除加入各种营养物质外,还应加入 、 等植物激素。?
(4)图D中的细胞团是 。?
(5)从理论上讲,植物细胞有形成再生植株的可能性,这是 的表现。?
解析:(1)植物组织培养技术可用下图表示:
外植体愈伤组织生芽、生根植株
(2)实验前所用器具和材料都应灭菌。
(3)在进行植物组织培养中,生长素和细胞分裂素在脱分化、再分化中起关键性作用。
(4)脱分化后形成的细胞团是愈伤组织。
(5)植物细胞发育成完整植株,是细胞全能性的表现。
答案:(1)BDCA
(2)灭菌
(3)生长素 细胞分裂素
(4)愈伤组织
(5)细胞全能性
13.植物组织培养的培养基中加入植物激素,下表是培养基中两种植物激素在不同比例时的实验结果,请分析回答下列问题。
实验组别 1 2 3 4
激素种类及 浓度关系 6—BA 6—BA >IBA 6—BA =IBA 6—BA 结果 组织块 产生愈 伤组织 愈伤组 织分化 出芽 愈伤组 织不断 生长 愈伤组 织有长 根趋势
(1)6—BA属于 类激素,其作用是 。?
(2)IBA属于 类激素,在本实验中的作用是?
。?
(3)在植物组织培养中,脱分化可用的激素组合是实验 和实验 中的浓度关系,再分化时可用的激素组合是实验 和实验 中的浓度关系。?
(4)植物组织培养的培养基中,除激素外,还必须含有 ,它的成分至少应该含有 、?
。?
解析:一般来说,当生长素用量与细胞分裂素用量的比值高时,有利于根的分化而对芽的形成有抑制作用;当生长素用量与细胞分裂素用量的比值低时,有利于芽的分化而抑制根的形成;当生长素用量与细胞分裂素用量相当时,则能促进愈伤组织的生长。由此可推断6—BA属于细胞分裂素类激素,IBA属于生长素类激素。
答案:(1)细胞分裂素 促进细胞分裂
(2)生长素 促进生根
(3)1 3 2 4
(4)营养物质 有机物 矿质元素
4
(共30张PPT)
第三节 植物组织培养技术
一
二
一
二
一
二
一
二
探究点一
探究点二
探究点三
探究点一
探究点二
探究点三
探究点一
探究点二
探究点三
探究点一
探究点二
探究点三
探究点一
探究点二
探究点三
探究点一
探究点二
探究点三
探究点一
探究点二
探究点三
探究点一
探究点二
探究点三
探究点一
探究点二
探究点三
探究点一
探究点二
探究点三
探究点一
探究点二
探究点三
探究点一
探究点二
探究点三
探究点一
探究点二
探究点三
探究点一
探究点二
探究点三
探究点一
探究点二
探究点三
探究点一
探究点二
探究点三
探究点一
探究点二
探究点三
探究点一
探究点二
探究点三
1 2 3 4 5 6
1 2 3 4 5 6
1 2 3 4 5 6
1 2 3 4 5 6
1 2 3 4 5 6
1 2 3 4 5 6
CoTE
(共5张PPT)
本章整合BENZHANG ZHENGHE
一
二
一
二
一
二
CoTE
第一章测评
(时间:60分钟 满分:100分)
一、选择题(每小题2.5分,共50分)
1.不同的微生物对营养物质的需求各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中,不正确的是( )
A.氮源物质为该微生物提供必要的氮素
B.碳源物质也是该微生物的能源物质
C.无机盐是该微生物不可缺少的营养物质
D.水是该微生物的营养要素之一
解析:CO2是自养微生物的碳源,但由于CO2是无机物,因此不是该类微生物的能源物质。
答案:B
2.下列不属于MS基本培养基的主要组成成分的是( )
A.大量元素 B.微量元素
C.蔗糖 D.植物激素
解析:MS基本培养基是一种基础培养基,主要成分包括大量元素、微量元素和有机物。
答案:D
3.高温灭菌的原理是( )
A.每种微生物生长的最适温度是一定的
B.微生物对高温环境不适应
C.高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸,影响其生命活动D.高温降低了环境中氧的浓度
解析:相对于动植物来说,微生物的耐高温能力是很强的。灭菌即杀死各种微生物及其他生命形态(如芽孢),所以要采用更高温度以破坏微生物体内蛋白质、核酸的分子活性,以使其永远丧失生活能力。
答案:C
4.用人工培养基来培养圆褐固氮菌。当向无菌培养箱中充入氮气时,其固氮量和菌落大小比充入无菌空气时( )
A.多和大 B.多和小
C.少和大 D.少和小
解析:圆褐固氮菌为异养需氧型,当向无菌培养箱中充入氮气时,会使其有氧呼吸受到抑制,生命活动所需要的能量供应不足,生命活动减弱,分裂、生长减缓,因此其固氮量和菌落大小比充入无菌空气时少和小。
答案:D
5.美国研究人员通过对大肠杆菌进行基因改造,可以使它将植物纤维逐渐转化为生物燃料。这种细菌不仅能以传统生物能源技术中使用的蔗糖为原料,还能将广泛存在于植物纤维中的半纤维素分解合成为燃料物质。若要将这种大肠杆菌分离出来,应将它们接种在( )
A.不含氮源的培养基上
B.含有蛋白胨的固体培养基上
C.只含半纤维素而无其他碳源的选择培养基上
D.不含营养要素的培养基上
解析:微生物生长繁殖所需的营养物质分为碳源、氮源、水和无机盐。要将能分解半纤维素的大肠杆菌分离出来应选用选择培养基。因此可以添加基因改造后大肠杆菌能利用而其他大肠杆菌不能利用的碳源(半纤维素)来达到分离选择所需细菌的目的。
答案:C
6.金黄色葡萄球菌有很强的致病力,常引起骨髓炎等,还可能引起食物中毒,下列实验结束后的做法错误的是( )
A.对接种环进行灼烧处理
B.带菌培养基必须经高压蒸汽灭菌锅灭菌后才能倒掉
C.带菌培养基必须经加热后才能倒掉
D.接种后双手必须经肥皂洗净,再用体积分数为75%的酒精棉球擦拭
解析:带菌培养基必须经高压蒸汽灭菌锅灭菌后才能倒掉,不能通过简单的加热后就倒掉,这样达不到灭菌效果。
答案:C
7.下列关于植物组织培养中灭菌操作的叙述,错误的是( )
A.外植体可以用酒精消毒
B.镊子等器械需用酒精灭菌
C.操作者的手需用酒精消毒
D.培养基需用高压蒸汽灭菌
解析:植物组织培养需要严格的无菌操作,包括:培养基需要用高压蒸汽灭菌;操作者的手需用酒精消毒;外植体应浸泡在酒精中消毒;对镊子等器械应进行灼烧灭菌;同时整个操作过程在酒精灯火焰旁或超净工作台上进行。
答案:B
8.常常作为人们鉴别菌种的重要依据的是( )
A.细菌群体的结构特征
B.单个细菌的结构特征
C.鞭毛、荚膜的有无
D.拟核、细胞壁的特征
解析:鉴别菌种的重要依据是菌落稳定的结构特征,包括菌落的形态、大小,隆起程度和颜色等方面。
答案:A
9.耐冷菌是生活在低温环境下的一类微生物,在0~5 ℃可生长繁殖,最高生长温度一般在30 ℃左右。关于耐冷菌下列选项中不正确的是( )
A.耐冷菌参与代谢的酶在低温下仍具有较高的催化活性
B.不同取样地点相比较,北方寒冷地区水土中较易分离出耐冷菌
C.探究耐冷菌生活的最适温度,自变量应为温度,无关变量应相同且适宜
D.分离纯化耐冷菌的过程中,使用过的培养基及培养物必须经过消毒处理后才能丢弃
解析:使用过的培养基必须经过灭菌处理后才能丢弃。
答案:D
10.植物组织培养接种时应注意的事项全部正确的是( )
①接种室要消毒 ②无菌操作 ③接种时可以谈话 ④外植体用自来水冲洗 ⑤接种时要防止交叉污染 ⑥接种完立刻盖好瓶口
A.①②③④ B.①②③④⑤⑥
C.③④⑤⑥ D.①②⑤⑥
解析:整个接种过程必须在严格的无菌条件下进行,不能谈话,防止造成污染。接种的外植体应用无菌水冲洗。
答案:D
11.下列有关微生物培养与应用的说法正确的是( )
A.天然培养基是指直接取自自然界不需加工的培养基
B.接种前需对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理
C.大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段
D.分离分解尿素的细菌时,尿素是培养基中唯一的氮源和碳源
解析:天然培养基是成分不明确的培养基,并不是不需加工配制的培养基;实验者的双手需进行消毒处理;分离分解尿素的细菌时,尿素是唯一氮源而不是唯一的碳源。
答案:C
12.要将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株,哪一项不是必须的?( )
A.具有完整细胞核的细胞
B.使培养对象处于离体状态
C.导入外源性目的基因
D.一定的营养和激素
答案:C
13.下列关于植物组织培养过程中的脱分化的叙述,正确的是( )
A.植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞的过程
B.体内分化的细胞在形态、结构和功能上发生改变的过程
C.高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程
D.愈伤组织分裂产生大量相同细胞的过程
解析:脱分化是指高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。
答案:C
14.下列属于菌落特征的是( )
①菌落的形状 ②菌落的大小 ③菌落的多少 ④隆起程度 ⑤颜色 ⑥有无荚膜
A.①②③④ B.①②④⑤
C.②③④⑥ D.①②③④⑤⑥
解析:不同种类的细菌所形成的菌落大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等方面具有一定特征,所以,每种细菌在一定条件下所形成的菌落,可以作为鉴定的重要依据。单个的细菌用肉眼是看不见的,故细菌的个体特征(如有无荚膜)不能作为菌种鉴定的依据。
答案:B
15.在植物组织培养中,切取胡萝卜的外植体时一般选择( )
A.具有木质部的部分 B.具有韧皮部的部分
C.具有形成层的部分 D.具有髓的部分
答案:C
16.某组织培养实验室的愈伤组织被真菌严重污染,为查找污染原因设计了四个实验,实验条件除图示外其他均相同。下列各图表示实验结果,据图不能得出的初步结论是( )
A.污染主要不是培养基灭菌时间短造成的
B.污染不可能来源于组织培养所用的离体组织
C.调节培养基pH不能解决污染问题
D.调节培养温度不能解决污染问题
解析:本题主要考查图文转换能力。①③④图解所示的信息是随培养基灭菌时间、培养基pH和培养温度的增加,污染率在90%上下波动,说明污染不是这三方面的原因;而②图解中随离体组织消毒时间的增加污染率急剧下降,因而,该曲线表明组织培养所用的离体组织是污染的主要因素。
答案:B
17.下列关于植物组织培养的表述,错误的是( )
A.外植体可以来自于植物的任何细胞
B.培养应在无菌条件下进行
C.以花粉作为外植体可得到单倍体植株
D.不同阶段的培养基中细胞分裂素和生长素的比例不同
解析:在植物组织培养中,外植体必须是具有活性的细胞,通常是分生能力强的细胞;培养需在无菌条件下进行;花粉为植物的配子,作为外植体可培养得到单倍体;在形成根和芽的过程中,要调节细胞分裂素与生长素的比例。
答案:A
18.植物组织培养依据的原理、培养过程的顺序及诱导的植物激素分别是( )
①细胞的全能性 ②离体植物器官、组织或细胞 ③根、芽
④生长素和细胞分裂素 ⑤生长素和乙烯 ⑥愈伤组织 ⑦再分化 ⑧脱分化 ⑨植物体
A.①、②⑦⑥⑧③⑨、④ B.①、②⑧⑥⑦③⑨、④
C.①、⑥②⑨⑧③⑦、⑤ D.①、②⑨⑧⑥⑦③、⑤
解析:植物组织培养依据的原理为植物体细胞的全能性;培养过程的顺序是离体植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织,再分化形成根、芽等进而形成新的植物体。诱导的植物激素是生长素和细胞分裂素。
答案:B
19.配制植物组织培养的培养基时下列各项可不必考虑的是( )
A.大量元素要充足 B.微量元素不可少
C.不能被杂菌污染 D.要有一定光照
解析:培养基中应含大量元素、微量元素以供植物细胞吸收利用;配制培养基时还要避免杂菌污染,否则,杂菌会与外植体争夺营养,也会造成外植体被侵染以致腐烂。配制培养基的过程不必考虑光照,但对外植体培养的过程要考虑光照。
答案:D
20.关于影响植物组织培养的因素,说法正确的是( )
A.不同植物组织培养的难易程度不同,同一种植物材料培养的难易程度相同
B.用于植物组织培养的培养基不需添加植物激素
C.植物激素中生长素和细胞分裂素的作用是互相独立的
D.pH、温度、光照条件等对植物组织培养特别重要
答案:D
二、非选择题(共50分)
21.(2014·四川高考理综)(10分)有机农药苯磺隆是一种除草剂,长期使用会污染环境。研究发现,苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。
图甲
图乙
(1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、 四类,该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源,其原因是 。?
(2)与微生物培养基相比,植物组织培养的培养基常需添加生长素和 。?
(3)纯化菌株时,通常使用的划线工具是 。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有 。?
(4)为探究苯磺隆的降解机制,将该菌种的培养液过滤离心,取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是 ,该实验设计是否合理?为什么? 。?
解析:(1)微生物生长繁殖所需营养物质有碳源、氮源、水和无机盐四类。该实验是要分离能降解苯磺隆的菌株,所以以苯磺隆作为唯一碳源。
(2)植物组织培养所用的植物激素是生长素和细胞分裂素。
(3)进行菌株纯化时,常用的划线工具是接种环。用接种环进行第二区域划线前需灼烧灭菌,灭菌后的接种环温度过高,若不经冷却立即进行划线操作,会使第一条线上无活菌存在。另外,若划线未从第一区域末端开始,也会导致题述的划线无菌落现象。
(4)据图可知,该实验的假设为该微生物产生的分解苯磺隆的物质是蛋白质,该实验的设计不合理,因为缺少空白对照实验。
答案:(1)氮源和无机盐 只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长繁殖
(2)细胞分裂素
(3)接种环 ①接种环灼烧后未冷却;②划线未从第一区域末端开始
(4)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质 不合理,缺少空白对照
22.(10分)临床试用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。实验时,首先要从病人身上获取少量样本,然后按照一定的实验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。完成下列问题。
(1)为了从样本中获取致病菌菌落,可用 法或 法将样本借种于固体培养基表面,经过选择培养、鉴别等步骤获得。?
(2)取该单菌落适当稀释,用 法接种于固体培养基表面,在37 ℃培养箱中培养24 h,使其均匀生长,布满平板。?
(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A敏感;含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对抗生素B ;含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明 ;?
含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的 。?
(4)根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好应选择抗生素 。?
解析:(1)分离菌落常用涂布平板法或平板划线法。(2)应用涂布平板法接种于固体培养基表面,适宜温度培养。(3)含抗生素的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对该抗生素有敏感性,周围没有透明圈的说明该抗生素不具有敏感性。透明圈越大的敏感性越强。(4)实验结果抗生素A对该致病菌的作用最好。
答案:(1)平板划线 涂布平板
(2)涂布平板
(3)不敏感 该致病菌对C的敏感性比对A弱 耐药菌
(4)A
23.(9分)Ⅰ.下图表示植物组织培养过程,请据此回答下列问题。
(1)①表示 ,它能培养成为④的根本原因是 。?
(2)②表示的是 。?
(3)若①是花药,则④是 幼苗,继续对其使用 处理可获得可育植株。?
(4)若①是胡萝卜根尖细胞,则培养成的④的叶片的颜色是 色。?
Ⅱ.利用植物组织培养的方法可快速、大量繁殖植物,在培养过程中,取该植物的花芽并将其分别培养在含有不同比例的吲哚乙酸和细胞分裂素的培养基中,花芽的生长状况如下表所示。
A组 花芽 B组 花芽 C组 花芽 D组 花芽 E组 花芽
0 3 3 0.03 0
0 0.2 0.002 1.0 0.2
续表
A组 花芽 B组 花芽 C组 花芽 D组 花芽 E组 花芽
花芽生 长状况 组织 切块 形成愈 伤组织 愈伤组织 分化出根 愈伤组 织分化 出嫩枝 稍生长
(1)在此过程中能实现脱分化的花芽是 组。从实验结果可以看出,能诱导新的花芽形成的条件是 。?
(2)上述实验结果说明,在植物组织培养过程中,诱导芽和根形成的关键是 。在生产实践中,欲快速、大量获得此植物的花芽,可选用 组的培养基进行扩大生产。?
解析:Ⅰ.图示为植物组织培养过程,①为外植体,②为愈伤组织,③为胚状结构,④为幼苗。若①是花药,则④是单倍体幼苗,继续对其使用秋水仙素处理可获得可育植株。无论用胡萝卜的哪一部分体细胞培育得到的幼苗,其叶片都是绿色的。
Ⅱ.本题用对比的实验手段演示了一个事实:脱分化、再分化过程与植物激素——生长素和细胞分裂素有关,且生长素用量与细胞分裂素用量直接影响培养过程,当生长素与细胞分裂素用量比值高时,有利于根的分化,抑制芽的形成;当生长素与细胞分裂素用量比值低时,有利于芽的分化,抑制根的形成;当用量相当时,有利于促进愈伤组织的形成。
答案:Ⅰ.(1)外植体(离体的器官、离体的组织、离体的细胞) 植物细胞的全能性
(2)愈伤组织
(3)单倍体 秋水仙素
(4)绿
Ⅱ.(1)B 生长素用量与细胞分裂素用量的比值低
(2)培养基中细胞分裂素含量与生长素含量之间的比例(或培养基中细胞分裂素与生长素的浓度比) D
24.(9分)某化工厂的污水池中,含有一种有害的、难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如图所示。请分析回答问题。
(1)培养基中加入化合物A的目的是筛选 ,这种培养基属于 培养基。?
(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源来自培养基中的 ,实验需要振荡培养,由此推测“目的菌”的代谢类型是 。?
(3)培养若干天后,应选择培养瓶中化合物A含量 的培养液,接入新的培养液中连续培养,使“目的菌”的数量 。?
(4)转为固体培养时,常采用 的方法接种,获得单菌落后继续筛选。?
(5)实验结束后,使用过的培养基应该进行 处理后才能倒掉。?
解析:题干中已说明了A是有机物,而且在培养基中又增加了磷酸盐、镁盐以及微量元素,通过比较各培养瓶中A的多少选出“目的菌”,由此可推断出“目的菌”所需碳源和氮源来自A,是异养型微生物。在对微生物的培养过程中及培养结束后注意灭菌。
答案:(1)目的菌 选择
(2)化合物A 异养需氧型
(3)减少 增加
(4)平板划线
(5)灭菌
25.(12分)下图是基因型为AaBb的天竺葵嫩叶离体培养示意图,据图回答下列问题。
天竺葵嫩叶培养基中培养AB植物体
(1)图中A是 ,B是 。?
(2)天竺葵的组织培养过程中,细胞增殖通过 分裂来完成。在培养形成试管苗的过程中,其中应大量供给的元素是 。试管苗形成过程中要给予一定光照,其目的是 。要促进茎尖细胞分裂和生长,培养基中应有 和 两类激素。?
(3)脱分化是指 ,脱分化和再分化这两个过程的进行还需要维持一定的外界条件,一是要有适宜的 ,二是要 ,否则植物组织培养就不能成功。?
(4)图示繁殖方式是 。?
解析:(1)图中A为脱分化的结果即愈伤组织,B为再分化形成的根及丛芽。(2)用于植物组织培养的培养基中需包括大量元素、微量元素、有机物及植物激素。(3)进行植物组织培养必须保证无菌操作。(4)经组织培养形成的试管苗,其基因型与外植体相同。
答案:(1)愈伤组织 根和芽
(2)有丝 N、S、P、K、Ca、Mg 试管苗形成过程中要进行光合作用合成有机物 细胞分裂素 生长素
(3)高度分化的植物器官、组织或细胞,通过离体培养产生愈伤组织的过程 温度 无菌
(4)无性生殖
6
