选修一 第四部分 实验11 植物的组织培养 课件（26张PPT）浙科版
文档属性
| 名称 | 选修一 第四部分 实验11 植物的组织培养 课件（26张PPT）浙科版 |  | |
| 格式 | ppt | ||
| 文件大小 | 14.0MB | ||
| 资源类型 | 教案 | ||
| 版本资源 | 浙科版 | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2021-01-07 16:55:52 | ||
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文档简介
(共26张PPT)
实验11
植物组织培养
试管苗大规模培养
实验目的:
1.进行菊花的组织培养
2.尝试植物激素的应用
通过必修课的学习，我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么，有没有不用种子来培育植物的方法呢？
组织培养
营养繁殖
扦插
嫁接
压条
无性繁殖
组织培养就是取一部分植物组织，如叶、芽、茎、根、花瓣或花粉等，在无菌条件下接种在三角瓶中的琼脂培养基上，给予一定的温度和光照，使之产生愈伤组织，或进而生根发芽。
一、组织培养概述
1.概念
植物细胞发挥全能性的条件：
1、离体；
2、无菌；
4、植物激素的诱导
3、有适合的营养物
质和适宜的外界条件；
（培养基、器具、
环境、操作过程）
生芽：
生根：
细胞分裂素多，
生长素少
生长素多
2、植物组织培养的原理是什么？
植物细胞具有全能性，即生物体的细胞，具有使后代细胞形成完整个体的能力。
比值高
诱导生芽
配制发芽培养基
大致相等
愈伤组织只生长不分化
比值低
诱导生根
配制生根培养基
植物激素的配比
主要是生长素和细胞分裂素
植物激素和人工合成的植物激素
植物激素
天然植物激素
人工合成的
植物激素类似物
生长素
萘乙酸（NAA）
细胞分裂素
苄基腺嘌呤（BA）
每一种激素的使用量、不同激素的配比
二、菊花的组织培养
(一)设备及用品
1.
100ml三角瓶或大口培养瓶
2.
镊子
3.
超净台
4.
灭菌锅
5.封口膜和橡皮圈
6.
有棉球的广口瓶
7.
酒精灯
8.三角漏斗
9.培养皿
(二)材料
1.MS培养基(用于配置发芽和生根培养基)
2.萘乙酸用少量0.1mol/LNaOH溶液溶解，苄基腺嘌呤用少量0.1mol/LHCL溶解
3.发芽培养基(灭菌)
4.生根培养基(灭菌)
MS固体培养基成分及比例
培养基需具备五大类营养要素
大量元素
微量元素
有机成分：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等
MS培养基
三、步骤
1.取外植体
超净台上将无菌幼苗切段,每段至少1张叶片
2
.接种
在酒精灯旁，生芽培养基中，放入1-3段切段(茎部插入培养基，盖上封口膜。
3.生芽培养
日光灯下保持18~25℃的温度培养，每天光照不少于14.5h。
三、步骤
４.生根培养
2~3周后，将生长健壮的丛状苗在无菌条件下转入生根培养基中，在上述条件下继续培养
。
5.适应锻炼
将苗转移至草炭土或蛭石中，用玻璃罩或塑料布保持80％以上的湿度，2~3天后打开减低湿度进行锻炼，直到将罩全部打开处于自然湿度下为止。
6.定植
将苗转移到土中培养，即可长成植株并开花。
??????
草炭土又叫泥炭土、黑土、草炭，是沼泽发育过程中的产物，形成于第四纪。是古代低温、湿地的植物遗体，被埋在地下，经数千万年的堆积，在气温较低、雨水较少或缺少空气的条件下，植物残体缓慢分解而形成的特殊有机物。
蛭石是一种天然、无机，无毒的矿物质，在高温作用下会膨胀的矿物。它是一种比较少见的矿物，属于硅酸盐。其晶体结构为单斜晶系，从它的外形看很像云母。
1、外植体带菌
2、培养基及接种器具灭菌不彻底
3、接种操作时带入
4、环境不清洁
污染途径
7.自然生长的茎进行组织培养方法:
70％乙醇中浸泡10分钟
5％次氯酸钠溶液中浸泡5min
5％次氯酸钠溶液中浸泡5min
超净台上用无菌水清洗
将茎移至生芽培养基中
3、如果在自然界取植物样本进行组织培养，你认为应采取
什么措施保证样本不被污染？
（1）操作环境清洁
（2）植物样本的洁净
（3）操作敏捷迅速
课后作业：
1、不同植物、不同组织的生根和生芽是否都可使用与本
实验相同的生长素和细胞分裂素浓度？
不可以。
不同植物、同一植物的不同器官所需要的最适激素浓度不同，需要探索使用何种合成激素和何种激素浓度才成。
2、本实验用人工合成的激素，而不用植物中存在的天然
激素，为什么？
植物中存在的天然激素都有相应的使之分解的酶，这样，天然激素在植物体内作用和存在的时间就较短，而人工合成激素在植物中没有相应的酶，所以作用和存在时间长，作用效果明显。
污染的预防措施
（一）防止外植体带菌
（二）保证培养基及接种器具彻底灭菌
（三）操作人员严格遵守无菌操作规程
（四）保证接种与培养环境清洁
菊花的组织培养步骤
④瓶外培养:将苗移至草炭土或蛭石中用玻璃(塑料)罩保持>80%湿度,2-3天后打开逐步降至自然
⑤移至土中培养.
实验步骤:
①超净台中无菌条件下切取无菌培养菊花苗段,每段至少带有1张叶片
②丛状苗培养:酒精灯旁将每段放入发芽培养基,茎部分插入,盖上封口膜,每瓶可放2-3段,
日光灯下保持18-25℃,每天光照不少于14.5h,2-3周培养成丛状苗
③
生根培养:无菌条件下将丛状苗转入生根培养基中同样条件下培养
注:如用自然茎则在70%酒精浸10min,再在5%次氯酸钠浸5min,再用另一5%次氯酸钠浸5min,最后超净台中无菌水清洗后再切段后培养。
实验11
植物组织培养
试管苗大规模培养
实验目的:
1.进行菊花的组织培养
2.尝试植物激素的应用
通过必修课的学习，我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么，有没有不用种子来培育植物的方法呢？
组织培养
营养繁殖
扦插
嫁接
压条
无性繁殖
组织培养就是取一部分植物组织，如叶、芽、茎、根、花瓣或花粉等，在无菌条件下接种在三角瓶中的琼脂培养基上，给予一定的温度和光照，使之产生愈伤组织，或进而生根发芽。
一、组织培养概述
1.概念
植物细胞发挥全能性的条件：
1、离体；
2、无菌；
4、植物激素的诱导
3、有适合的营养物
质和适宜的外界条件；
（培养基、器具、
环境、操作过程）
生芽：
生根：
细胞分裂素多，
生长素少
生长素多
2、植物组织培养的原理是什么？
植物细胞具有全能性，即生物体的细胞，具有使后代细胞形成完整个体的能力。
比值高
诱导生芽
配制发芽培养基
大致相等
愈伤组织只生长不分化
比值低
诱导生根
配制生根培养基
植物激素的配比
主要是生长素和细胞分裂素
植物激素和人工合成的植物激素
植物激素
天然植物激素
人工合成的
植物激素类似物
生长素
萘乙酸（NAA）
细胞分裂素
苄基腺嘌呤（BA）
每一种激素的使用量、不同激素的配比
二、菊花的组织培养
(一)设备及用品
1.
100ml三角瓶或大口培养瓶
2.
镊子
3.
超净台
4.
灭菌锅
5.封口膜和橡皮圈
6.
有棉球的广口瓶
7.
酒精灯
8.三角漏斗
9.培养皿
(二)材料
1.MS培养基(用于配置发芽和生根培养基)
2.萘乙酸用少量0.1mol/LNaOH溶液溶解，苄基腺嘌呤用少量0.1mol/LHCL溶解
3.发芽培养基(灭菌)
4.生根培养基(灭菌)
MS固体培养基成分及比例
培养基需具备五大类营养要素
大量元素
微量元素
有机成分：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等
MS培养基
三、步骤
1.取外植体
超净台上将无菌幼苗切段,每段至少1张叶片
2
.接种
在酒精灯旁，生芽培养基中，放入1-3段切段(茎部插入培养基，盖上封口膜。
3.生芽培养
日光灯下保持18~25℃的温度培养，每天光照不少于14.5h。
三、步骤
４.生根培养
2~3周后，将生长健壮的丛状苗在无菌条件下转入生根培养基中，在上述条件下继续培养
。
5.适应锻炼
将苗转移至草炭土或蛭石中，用玻璃罩或塑料布保持80％以上的湿度，2~3天后打开减低湿度进行锻炼，直到将罩全部打开处于自然湿度下为止。
6.定植
将苗转移到土中培养，即可长成植株并开花。
??????
草炭土又叫泥炭土、黑土、草炭，是沼泽发育过程中的产物，形成于第四纪。是古代低温、湿地的植物遗体，被埋在地下，经数千万年的堆积，在气温较低、雨水较少或缺少空气的条件下，植物残体缓慢分解而形成的特殊有机物。
蛭石是一种天然、无机，无毒的矿物质，在高温作用下会膨胀的矿物。它是一种比较少见的矿物，属于硅酸盐。其晶体结构为单斜晶系，从它的外形看很像云母。
1、外植体带菌
2、培养基及接种器具灭菌不彻底
3、接种操作时带入
4、环境不清洁
污染途径
7.自然生长的茎进行组织培养方法:
70％乙醇中浸泡10分钟
5％次氯酸钠溶液中浸泡5min
5％次氯酸钠溶液中浸泡5min
超净台上用无菌水清洗
将茎移至生芽培养基中
3、如果在自然界取植物样本进行组织培养，你认为应采取
什么措施保证样本不被污染？
（1）操作环境清洁
（2）植物样本的洁净
（3）操作敏捷迅速
课后作业：
1、不同植物、不同组织的生根和生芽是否都可使用与本
实验相同的生长素和细胞分裂素浓度？
不可以。
不同植物、同一植物的不同器官所需要的最适激素浓度不同，需要探索使用何种合成激素和何种激素浓度才成。
2、本实验用人工合成的激素，而不用植物中存在的天然
激素，为什么？
植物中存在的天然激素都有相应的使之分解的酶，这样，天然激素在植物体内作用和存在的时间就较短，而人工合成激素在植物中没有相应的酶，所以作用和存在时间长，作用效果明显。
污染的预防措施
（一）防止外植体带菌
（二）保证培养基及接种器具彻底灭菌
（三）操作人员严格遵守无菌操作规程
（四）保证接种与培养环境清洁
菊花的组织培养步骤
④瓶外培养:将苗移至草炭土或蛭石中用玻璃(塑料)罩保持>80%湿度,2-3天后打开逐步降至自然
⑤移至土中培养.
实验步骤:
①超净台中无菌条件下切取无菌培养菊花苗段,每段至少带有1张叶片
②丛状苗培养:酒精灯旁将每段放入发芽培养基,茎部分插入,盖上封口膜,每瓶可放2-3段,
日光灯下保持18-25℃,每天光照不少于14.5h,2-3周培养成丛状苗
③
生根培养:无菌条件下将丛状苗转入生根培养基中同样条件下培养
注:如用自然茎则在70%酒精浸10min,再在5%次氯酸钠浸5min,再用另一5%次氯酸钠浸5min,最后超净台中无菌水清洗后再切段后培养。