选修一 第二部分 实验6 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测 课件(19张PPT) 浙科版

果汁中的果胶和果胶酶
考点一
命题设计
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植物细胞壁
半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯
果胶甲酯
要点突破
实验6：
α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测
1.制备固定化a-淀粉酶
2.用固定化a-淀粉酶进行淀粉水解的测定
3.进行固定化a-淀粉酶重复利用效果实验
实验目的：
定义：酶的活性受外界环境的影响较大，为了保持酶的活性，往往将酶液经过分离提纯、浓缩或干燥等工艺过程，制备成液态、粉状或颗粒状的制品，这就是通常所称的酶制剂。
酶的生产：
①提取法
②发酵法 (通过微生物发酵获得所需要的酶)
优点：催化效率高、低能耗、低污染
缺点：易失活、难回收,不能被再次利用、难分离
酶制剂
固定化酶：就是将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。
优点：
（1）使酶既能与反应物接触，又能与产物分离；
（2）固定在载体上的酶可以被反复利用。
固定化酶技术
吸附法、
交联法、
包埋法、
共价偶连法
固定化方法
2.酶的固定化方法及适用对象
　α?淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测
考点二
命题设计
技法提炼
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要点突破
实验1.a-淀粉酶的固定化：
方法：
载体：　
吸附法
石英砂
淀粉溶液
固定化酶柱
实验原理：一定浓度的淀粉溶液经过固定化酶柱后，可使淀粉水解成糊精，用淀粉指示剂溶液测试，流出物呈红色表明水解产物糊精生成
淀粉
α-淀粉酶
糊精
Β-淀粉酶
葡萄糖
糖化淀粉酶
麦芽糖
遇碘显蓝色
遇碘显红色
遇碘不显色
枯草杆菌
　实验二、固定化α?淀粉酶对淀粉水解作用的检测
实验步骤一.a-淀粉酶的固定化
方法：
载体：　
吸附法
石英砂
　α?淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测
淀粉溶液
KI?I2
考点二
命题设计
技法提炼
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要点突破
用１０倍柱体积的蒸馏水洗涤注射器
反应柱
固定化酶
气门心
夹子
5ml注射器
淀粉
淀粉溶液
固定化酶柱
实验结果
1 2 3 4
1、2mL水+1-2滴KI-I2溶液
、2mL淀粉液+1-2滴KI-I2溶液
、2mL淀粉滤液+1-2滴KI-I2溶液
、2mL淀粉滤液+1-2滴KI-I2溶液+稀释1倍
实验注意事项
a.控制滴灌流速。0.3mL/min的流速，我们就可以控制每分钟滴管流出量为每分钟6滴（6=0.3mL/ 50uL）。这样做的目的是控制流速让淀粉和淀粉酶充分接触，反应。
b.显色。在流出5mL后接取0.5mL过滤液，然后向试管中加入1-2滴KI-I2 溶液。切记，KI-I2 溶液不要加入太多，以免碘液颜色覆盖糊精淀粉反应后的颜色。
1.如何证明洗涤固定化酶柱的流出液中没有淀粉酶?
可在试管中加入1ml可溶性淀粉，再加几滴淀粉酶柱流出液，保温几分钟后用碘液检验。如仍显蓝色，则流出液中没有淀粉酶了。
2.耐高温的淀粉酶有哪些可能的用途?
可以在高温下使淀粉快速水解，而且酶不会因高温上而失活，所以可在一些需要高温加热同时又要水解淀粉的反应中使用。
思考与练习
类型
优点
不足
直接使用酶
固定化酶
直接使用酶和固定化酶的优缺点
催化效率高
低耗能
低污染
酶既能与反应物接触，又能与产物分离，同时，固定在载体上的酶还可以被反复利用
对环境条件非常敏感，容易失活；溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，提高了生产成本；反应后酶会混在产物中，难分离
在生产实践中，很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能得到的
难以一次性固定化多种酶
再 见