《同步测控全优设计》2013-2014学年高中生物中图版选修1单元检测：第一章 微生物培养技术（含答案）
文档属性
| 名称 | 《同步测控全优设计》2013-2014学年高中生物中图版选修1单元检测：第一章 微生物培养技术（含答案） |  | |
| 格式 | zip | ||
| 文件大小 | 21.6KB | ||
| 资源类型 | 教案 | ||
| 版本资源 | 中图版 | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2014-04-25 11:01:33 | ||
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文档简介
生物中图版选修1第一章微生物培养技术单元检测
（时间：45分钟，满分：100分）
一、选择题（每小题3分，共60分）
1 微生物（除病毒外）需要从外界吸收营养物质并通过代谢来维持正常的生长和繁殖。下列有关微生物营养的说法正确的是（ ）。
A．乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的
B．微生物生长中不可缺少的一些微量的无机物称为生长因子
C．培养基中的营养物质浓度越高对微生物的增殖越有利
D．生长因子一般是酶或核酸的组成成分，微生物本身合成这些生长因子的能力往往不足
2 在接种操作的过程中，不正确的是（ ）。
A．要将接种环灼烧灭菌
B．取下棉塞后要将试管口灼烧灭菌
C．将接种环伸入试管内，先接触长菌多的部位
D．接种后还要将管口灭菌加塞
3 高温灭菌的原理是（ ）。
A．每种微生物生长的最适温度是一定的
B．微生物对高温环境不适应
C．高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸，影响其生命活动
D．高温降低了环境中氧的浓度
4 将配制好的培养基进行灭菌应用（ ）。
A．灼烧灭菌 B．高压蒸汽灭菌
C．干热灭菌 D．煮沸灭菌
5 产生标准形态菌落的细菌的最初数目和培养基分别是（ ）。
A．一个细菌、液体培养基
B．许多细菌、液体培养基
C．一个细菌、固体培养基
D．许多细菌、固体培养基
6 灭菌的标准是（ ）。
A．杀死所有的病原微生物
B．杀死所有的微生物
C．杀死所有微生物的细胞、芽孢和孢子
D．病原菌不生长
7 下列属于菌落特征的是（ ）。
①菌落的形状 ②菌落的大小 ③菌落的多少 ④隆起程度 ⑤颜色 ⑥有无荚膜
A．①②③④ B．①②④⑤
C．②③④⑥ D．①②③④⑤⑥
8 尿素是尿素分解菌的氮源，因此在配制培养基时（ ）。
A．葡萄糖在培养基中越多越好
B．尿素分解菌有固氮能力，故培养基中只需无机氮
C．尿素在培养基中越少越好
D．尿素分解菌无固氮能力，故培养基中的尿素为化合态氮
9 突变型面包霉常需要在基本培养基上添加适当的氨基酸才能生长。现在用两种氨基酸依赖型红色面包霉突变株a和b，分别接种到下面的6种培养基上，两种突变株都不能在1、3、5号培养基上生长，a、b可以分别在2、4和2、6号培养基上生长。培养基成分如下表，关于突变株a和b分别对于A～J中氨基酸需求的说法正确的是（ ）。
培养基
1
2
3
4
5
6
添加氨基酸
BCDE
BEFG
CFHI
DEFI
GHIJ
EHGJ
A．两种突变株对氨基酸的需求是相同的
B．两种突变株都需要G氨基酸才能生长
C．两种突变株必须同时供应4种氨基酸才能生长
D．两种突变株都能在由4、5号两种培养基组成的混合培养基中生长
10 能排除培养基是否有杂菌污染的方法是（ ）。
A．将未接种的培养基放在实验桌上培养
B．将未接种的培养基放在窗台上培养
C．将未接种的培养基放在恒温箱中培养
D．将已接种的培养基放在恒温箱中培养
11 有关平板划线操作不正确的是（ ）。
A．将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红
B．接种环在平板上划线位置是随机的
C．在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰
D．最后将平板倒置，放入恒温箱中培养
12 有关培养基配制原则叙述不正确的是（ ）。
A．异养微生物的培养基至少要有一种有机物
B．任何培养基都必须含有水、碳源、氮源、无机盐及生长因子
C．配制培养基时，要注意各种营养物质的浓度和比例
D．微生物的生长除受营养因素影响外，还受到pH、氧、渗透压的影响
13 关于稀释涂布平板法的操作步骤正确的是（ ）。
①土壤取样 ②称取10 g土壤取出加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中 ③吸取0.1 mL土壤溶液进行平板涂布 ④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度
A．①→②→③→④ B．①→③→②→④
C．①→②→④→③ D．①→④→②→③
14 下列选项中，不是使用选择培养基培养微生物的目的是（ ）。
A．除去其他微生物
B．使需要的微生物大量繁殖
C．通过表现特殊性状，与其他微生物相区别
D．可以增加要培养的微生物的浓度
15 关于选择培养正确的是（ ）。
A．可以增加纤维素分解菌的浓度
B．可以减少纤维素分解菌的浓度
C．所用培养基是固体培养基
D．选择培养不可以省略，但可以重复操作
16 能合成尿素分解酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是（ ）。
A．CO2和N2 B．葡萄糖和NH3
C．CO2和尿素 D．葡萄糖和尿素
17 要将从土壤中提取的自生固氮菌与其他细菌分离开来，应将它们接种在（ ）。
A．含五大类营养物质的培养基上
B．加入某种指示剂的鉴别培养基上
C．含蛋白胨等营养物质的培养基上
D．无氮的选择培养基上
18 关于灭菌和消毒的不正确的理解是（ ）。
A．灭菌是指杀死环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子
B．消毒和灭菌实质上是相同的
C．接种环用烧灼的方法灭菌
D．常用灭菌方法有加热法、过滤法、红外线法、化学药品法
19 下列关于细菌的叙述，错误的是（ ）。
A．硝化细菌能以NH3作为氮源和能源物质
B．某些细菌可以利用光能固定CO2合成有机物
C．生长因子是某些细菌生长过程中需要额外补充的营养物质
D．含伊红和美蓝试剂的培养基不能用来鉴别牛奶中的大肠杆菌
20 不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是（ ）。
A．氮源物质为该微生物提供必要的氮素
B．碳源物质也是该微生物的能源物质
C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质
D．水是该微生物的营养要素之一
二、非选择题（共40分）
21 （9分）下表所示为某微生物培养基的配方，请回答：
成分
含量
成分
含量
NaNO3
3 g
FeSO4
0.01 g
K2HPO4
1 g
（CH2O）
30 g
琼脂
15 g
H2O
1 000 mL
MgSO4·7H2O
0.5 g
青霉素
0.1万单位
（1）依物理性质，该培养基属于________培养基。依用途划分，则属于________培养基。
（2）根据培养基原料，所培养微生物的同化作用的类型是________，培养的微生物可能是________。
（3）该培养基中的碳源是________。不论何种培养基，在各成分都溶化后分装前，要进行的是________。
（4）若用该培养液培养纤维素分解菌，应除去的物质是________，应加入的物质是________。
（5）细菌种群进化过程中，其主要作用的变异来源是________。
A．环境条件 B．基因重组
C．基因突变 D．染色体变异
22 （5分）有人送来一支芽孢杆菌，其中一部分芽孢杆菌有抗青霉素能力，另一部分没有抗性。
请你把对青霉素有抗性的芽孢杆菌分离出来。现有条件：无菌牛肉膏培养基两个，无菌接种台，接种工具齐备，医用青霉素两支。请你填写有关的实验操作及实验分析。
（1）取两个培养基，分别标号A、B，A、B培养基分别加入________，加入过程一定要________操作。
（2）向A培养基中接种__________________。
（3）接种后，将A培养基放入恒温箱培养两天。
（4）从________挑取生长良好的芽孢杆菌，接到B培养基中。
（5）接种后，将B培养基放入恒温箱内培养两天，即可获得较多抗青霉素芽孢杆菌。第（4）（5）两个步骤的目的是__________________________________________________。
23 （6分）科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白。这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。
（1）可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的体外抗菌特性。抗菌实验所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供________和________。
（2）分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液。培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的________，确定该蛋白的抗菌效果。
（3）细菌培养常用的接种方法有________和________。实验结束后，对使用过的培养基应进行________处理。
24 （10分）某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。
（1）培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了________和________。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是________和________。
（2）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于________中培养，培养的温度设定在37 ℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种________作为对照进行实验。
（3）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有________种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越________。
（4）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐________细菌，这种培养基被称为________。
25 （2011·课标全国理综）（4分）有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题。
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以________为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于________培养基。
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即________和________。
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力________。
（4）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、________和________。无菌技术要求实验操作应在酒精灯________附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。
26 （6分）自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。步骤如下：
A．制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。
B．为了得到更加准确的结果，你选用________（稀释混合平板法、稀释涂布平板法）接种样品。
C．适宜温度下培养。
结果分析：
（1）测定的大肠杆菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确可信的是________。
A．一个平板，统计的菌落数是23
B．两个平板，统计的菌落数是22和26，取平均值24
C．三个平板，统计的菌落数分别是21、5和52，取平均值26
D．四个平板，统计的菌落数分别是21、30、24和25，取平均值25
（2）一同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4，那么每毫升样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.2 mL）________。
（3）用这种方法测定密度，实际活菌数量要比测得的数量________，因为_______________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________。
（4）某同学在测定大肠杆菌的密度时发现，在培养基上还有其他杂菌的菌落，能否肯定该大肠杆菌的品系被污染了？为什么？
参考答案
1 解析：硝化细菌是自养生物，不需要加碳源；生长因子是微量的有机物；营养物质浓度过高会导致微生物的细胞失水。
答案：D
2 答案：C
3 解析：相对于动植物来说，微生物的耐高温能力是很强的。灭菌即杀死各种微生物及其他生命形态（如芽孢），所以要采用更高温度以破坏微生物体内蛋白质、核酸的分子活性，以使其永远丧失生活能力。
答案：C
4 答案：B
5 解析：在液体培养基中生活的细菌，无论是一个还是许多，肉眼都是不可见的。在固体培养基上的细菌，当数目较少时也是不可见的。当固体培养基上有许多细菌并且集中在较小范围内，肉眼可见。而菌落是一个细菌或几个细菌的子细胞群体，形成于固体培养基上，有一定的形态结构，所以肉眼可见。同种细菌形成的菌落，形态结构是相同的。如果有许多细菌形成的菌落，就不可能有比较标准的形态，因为这许多细菌第一不可能是同一种细菌，第二不可能在培养基的同一个点上。
答案：C
6 答案：C
7 解析：不同种类的细菌所形成的菌落大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等方面具有一定特征，所以，每种细菌在一定条件下所形成的菌落，可以作为鉴定的重要依据。单个的细菌用肉眼是看不见的，故细菌的个体特征不能作为菌种鉴定的依据。
答案：B
8 答案：D
9 答案：D
10 答案：C
11 答案：B
12 解析：不同微生物对营养的需求不同，如自生固氮菌能利用空气中的N2为氮源，因而培养基中无需氮源。
答案：B
13 解析：在分离土壤中某细菌时，应先选取土样（10 g），然后加无菌水获得土壤浸出液，并进行不同倍数稀释，最后将稀释液涂布到培养基表面进行培养，并分离和计数。
答案：C
14 答案：C
15 解析：选择培养是可以增加纤维素分解菌的浓度，所用培养基是液体培养基，以便于下一步的稀释操作。
答案：A
16 解析：能合成尿素分解酶的微生物可以分解尿素，所以氮源为尿素；而这种微生物为异养生物，所以其碳源为含碳有机物葡萄糖。
答案：D
17 答案：D
18 答案：B
19 解析：某些细菌如蓝细菌（蓝藻）、光合细菌以及红螺菌都能进行光合作用。生长因子是指微生物生长不可缺少的微量有机物，主要包括维生素、氨基酸和碱基等。而微生物的营养物质包括水、无机盐、碳源、氮源和生长因子，它们都是要从外界获得补充的。常用的伊红—美蓝乳糖培养基，可用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌，如果有大肠杆菌，因其强烈分解乳糖而产生大量的混合酸，菌体带H＋，故菌落被染成深紫色，从菌落表面的反射光中还可以看到金属光泽。
答案：D
20 解析：CO2是无机碳源，不能作为该微生物的能源物质。
答案：B
21 答案：（1）固体 选择 （2）异养型 酵母菌或霉菌
（3）（CH2O） 先调整pH （4）青霉素和（CH2O） 纤维素粉 （5）C
22 解析：回答（2）要注意答“适量的芽孢杆菌菌种”，不能简单答成“芽孢杆菌”，太少了可能得不到抗青霉素菌菌落。
答案：（1）青霉素 无菌 （2）适量的芽孢杆菌菌种
（4）A培养基的菌落 （5）获得纯度高的抗青霉素芽孢杆菌（分离出对青霉素有抗性的芽孢杆菌）
23 答案：（1）碳源 氮源 （2）数量 （3）平板划线法 稀释涂布平板法（稀释混合平板法） 灭菌
24 解析：培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。由于微生物具有不同的营养类型，对营养物质的要求也各不相同，加之实验和研究的目的不同，所以培养基的种类很多，使用的原料也各有差异，但从营养角度分析，培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐以及水分等。另外，培养基还应具有适宜的pH、一定的缓冲能力、一定的氧化还原电位及合适的渗透压等。通过观察培养基上菌落的多少，可确定湖水细菌污染程度。高NaCl浓度的培养基可筛选出耐盐的细菌。
答案：（1）氮源（碳源不作要求） 碳源 无机盐 水
（2）恒温培养箱 无菌水 （3）多 高 （4）盐（或NaCl） 选择性培养基
25 解析：（1）要获得分解原油的细菌，只有在以原油为唯一碳源的培养基中，这种细菌可以大量繁殖，而其他细菌不能生存。此种培养基属于选择培养基。（2）纯化菌种常用平板划线法和稀释涂布平板法。（3）在以原油为唯一碳源的培养基上，在菌落周围的原油被分解而形成分解圈，分解圈越大，说明该菌株降解能力越强。（4）实验室灭菌有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等，实验操作要在酒精灯火焰附近的无菌区进行。
答案：（1）原油 选择 （2）平板划线法 稀释涂布平板法 （3）强 （4）干热灭菌 高压蒸汽灭菌 火焰
26 解析：样品菌落数计算公式：（C/V）·M，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数。V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。
答案：步骤B：稀释混合平板法
结果分析：（1）D （2）1.17×107 （3）多 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落 （4）不能。因为不能排除杂菌来自培养基或来自培养过程。
（时间：45分钟，满分：100分）
一、选择题（每小题3分，共60分）
1 微生物（除病毒外）需要从外界吸收营养物质并通过代谢来维持正常的生长和繁殖。下列有关微生物营养的说法正确的是（ ）。
A．乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的
B．微生物生长中不可缺少的一些微量的无机物称为生长因子
C．培养基中的营养物质浓度越高对微生物的增殖越有利
D．生长因子一般是酶或核酸的组成成分，微生物本身合成这些生长因子的能力往往不足
2 在接种操作的过程中，不正确的是（ ）。
A．要将接种环灼烧灭菌
B．取下棉塞后要将试管口灼烧灭菌
C．将接种环伸入试管内，先接触长菌多的部位
D．接种后还要将管口灭菌加塞
3 高温灭菌的原理是（ ）。
A．每种微生物生长的最适温度是一定的
B．微生物对高温环境不适应
C．高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸，影响其生命活动
D．高温降低了环境中氧的浓度
4 将配制好的培养基进行灭菌应用（ ）。
A．灼烧灭菌 B．高压蒸汽灭菌
C．干热灭菌 D．煮沸灭菌
5 产生标准形态菌落的细菌的最初数目和培养基分别是（ ）。
A．一个细菌、液体培养基
B．许多细菌、液体培养基
C．一个细菌、固体培养基
D．许多细菌、固体培养基
6 灭菌的标准是（ ）。
A．杀死所有的病原微生物
B．杀死所有的微生物
C．杀死所有微生物的细胞、芽孢和孢子
D．病原菌不生长
7 下列属于菌落特征的是（ ）。
①菌落的形状 ②菌落的大小 ③菌落的多少 ④隆起程度 ⑤颜色 ⑥有无荚膜
A．①②③④ B．①②④⑤
C．②③④⑥ D．①②③④⑤⑥
8 尿素是尿素分解菌的氮源，因此在配制培养基时（ ）。
A．葡萄糖在培养基中越多越好
B．尿素分解菌有固氮能力，故培养基中只需无机氮
C．尿素在培养基中越少越好
D．尿素分解菌无固氮能力，故培养基中的尿素为化合态氮
9 突变型面包霉常需要在基本培养基上添加适当的氨基酸才能生长。现在用两种氨基酸依赖型红色面包霉突变株a和b，分别接种到下面的6种培养基上，两种突变株都不能在1、3、5号培养基上生长，a、b可以分别在2、4和2、6号培养基上生长。培养基成分如下表，关于突变株a和b分别对于A～J中氨基酸需求的说法正确的是（ ）。
培养基
1
2
3
4
5
6
添加氨基酸
BCDE
BEFG
CFHI
DEFI
GHIJ
EHGJ
A．两种突变株对氨基酸的需求是相同的
B．两种突变株都需要G氨基酸才能生长
C．两种突变株必须同时供应4种氨基酸才能生长
D．两种突变株都能在由4、5号两种培养基组成的混合培养基中生长
10 能排除培养基是否有杂菌污染的方法是（ ）。
A．将未接种的培养基放在实验桌上培养
B．将未接种的培养基放在窗台上培养
C．将未接种的培养基放在恒温箱中培养
D．将已接种的培养基放在恒温箱中培养
11 有关平板划线操作不正确的是（ ）。
A．将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红
B．接种环在平板上划线位置是随机的
C．在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰
D．最后将平板倒置，放入恒温箱中培养
12 有关培养基配制原则叙述不正确的是（ ）。
A．异养微生物的培养基至少要有一种有机物
B．任何培养基都必须含有水、碳源、氮源、无机盐及生长因子
C．配制培养基时，要注意各种营养物质的浓度和比例
D．微生物的生长除受营养因素影响外，还受到pH、氧、渗透压的影响
13 关于稀释涂布平板法的操作步骤正确的是（ ）。
①土壤取样 ②称取10 g土壤取出加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中 ③吸取0.1 mL土壤溶液进行平板涂布 ④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度
A．①→②→③→④ B．①→③→②→④
C．①→②→④→③ D．①→④→②→③
14 下列选项中，不是使用选择培养基培养微生物的目的是（ ）。
A．除去其他微生物
B．使需要的微生物大量繁殖
C．通过表现特殊性状，与其他微生物相区别
D．可以增加要培养的微生物的浓度
15 关于选择培养正确的是（ ）。
A．可以增加纤维素分解菌的浓度
B．可以减少纤维素分解菌的浓度
C．所用培养基是固体培养基
D．选择培养不可以省略，但可以重复操作
16 能合成尿素分解酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是（ ）。
A．CO2和N2 B．葡萄糖和NH3
C．CO2和尿素 D．葡萄糖和尿素
17 要将从土壤中提取的自生固氮菌与其他细菌分离开来，应将它们接种在（ ）。
A．含五大类营养物质的培养基上
B．加入某种指示剂的鉴别培养基上
C．含蛋白胨等营养物质的培养基上
D．无氮的选择培养基上
18 关于灭菌和消毒的不正确的理解是（ ）。
A．灭菌是指杀死环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子
B．消毒和灭菌实质上是相同的
C．接种环用烧灼的方法灭菌
D．常用灭菌方法有加热法、过滤法、红外线法、化学药品法
19 下列关于细菌的叙述，错误的是（ ）。
A．硝化细菌能以NH3作为氮源和能源物质
B．某些细菌可以利用光能固定CO2合成有机物
C．生长因子是某些细菌生长过程中需要额外补充的营养物质
D．含伊红和美蓝试剂的培养基不能用来鉴别牛奶中的大肠杆菌
20 不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是（ ）。
A．氮源物质为该微生物提供必要的氮素
B．碳源物质也是该微生物的能源物质
C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质
D．水是该微生物的营养要素之一
二、非选择题（共40分）
21 （9分）下表所示为某微生物培养基的配方，请回答：
成分
含量
成分
含量
NaNO3
3 g
FeSO4
0.01 g
K2HPO4
1 g
（CH2O）
30 g
琼脂
15 g
H2O
1 000 mL
MgSO4·7H2O
0.5 g
青霉素
0.1万单位
（1）依物理性质，该培养基属于________培养基。依用途划分，则属于________培养基。
（2）根据培养基原料，所培养微生物的同化作用的类型是________，培养的微生物可能是________。
（3）该培养基中的碳源是________。不论何种培养基，在各成分都溶化后分装前，要进行的是________。
（4）若用该培养液培养纤维素分解菌，应除去的物质是________，应加入的物质是________。
（5）细菌种群进化过程中，其主要作用的变异来源是________。
A．环境条件 B．基因重组
C．基因突变 D．染色体变异
22 （5分）有人送来一支芽孢杆菌，其中一部分芽孢杆菌有抗青霉素能力，另一部分没有抗性。
请你把对青霉素有抗性的芽孢杆菌分离出来。现有条件：无菌牛肉膏培养基两个，无菌接种台，接种工具齐备，医用青霉素两支。请你填写有关的实验操作及实验分析。
（1）取两个培养基，分别标号A、B，A、B培养基分别加入________，加入过程一定要________操作。
（2）向A培养基中接种__________________。
（3）接种后，将A培养基放入恒温箱培养两天。
（4）从________挑取生长良好的芽孢杆菌，接到B培养基中。
（5）接种后，将B培养基放入恒温箱内培养两天，即可获得较多抗青霉素芽孢杆菌。第（4）（5）两个步骤的目的是__________________________________________________。
23 （6分）科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白。这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。
（1）可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的体外抗菌特性。抗菌实验所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供________和________。
（2）分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液。培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的________，确定该蛋白的抗菌效果。
（3）细菌培养常用的接种方法有________和________。实验结束后，对使用过的培养基应进行________处理。
24 （10分）某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。
（1）培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了________和________。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是________和________。
（2）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于________中培养，培养的温度设定在37 ℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种________作为对照进行实验。
（3）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有________种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越________。
（4）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐________细菌，这种培养基被称为________。
25 （2011·课标全国理综）（4分）有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题。
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以________为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于________培养基。
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即________和________。
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力________。
（4）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、________和________。无菌技术要求实验操作应在酒精灯________附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。
26 （6分）自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。步骤如下：
A．制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。
B．为了得到更加准确的结果，你选用________（稀释混合平板法、稀释涂布平板法）接种样品。
C．适宜温度下培养。
结果分析：
（1）测定的大肠杆菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确可信的是________。
A．一个平板，统计的菌落数是23
B．两个平板，统计的菌落数是22和26，取平均值24
C．三个平板，统计的菌落数分别是21、5和52，取平均值26
D．四个平板，统计的菌落数分别是21、30、24和25，取平均值25
（2）一同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4，那么每毫升样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.2 mL）________。
（3）用这种方法测定密度，实际活菌数量要比测得的数量________，因为_______________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________。
（4）某同学在测定大肠杆菌的密度时发现，在培养基上还有其他杂菌的菌落，能否肯定该大肠杆菌的品系被污染了？为什么？
参考答案
1 解析：硝化细菌是自养生物，不需要加碳源；生长因子是微量的有机物；营养物质浓度过高会导致微生物的细胞失水。
答案：D
2 答案：C
3 解析：相对于动植物来说，微生物的耐高温能力是很强的。灭菌即杀死各种微生物及其他生命形态（如芽孢），所以要采用更高温度以破坏微生物体内蛋白质、核酸的分子活性，以使其永远丧失生活能力。
答案：C
4 答案：B
5 解析：在液体培养基中生活的细菌，无论是一个还是许多，肉眼都是不可见的。在固体培养基上的细菌，当数目较少时也是不可见的。当固体培养基上有许多细菌并且集中在较小范围内，肉眼可见。而菌落是一个细菌或几个细菌的子细胞群体，形成于固体培养基上，有一定的形态结构，所以肉眼可见。同种细菌形成的菌落，形态结构是相同的。如果有许多细菌形成的菌落，就不可能有比较标准的形态，因为这许多细菌第一不可能是同一种细菌，第二不可能在培养基的同一个点上。
答案：C
6 答案：C
7 解析：不同种类的细菌所形成的菌落大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等方面具有一定特征，所以，每种细菌在一定条件下所形成的菌落，可以作为鉴定的重要依据。单个的细菌用肉眼是看不见的，故细菌的个体特征不能作为菌种鉴定的依据。
答案：B
8 答案：D
9 答案：D
10 答案：C
11 答案：B
12 解析：不同微生物对营养的需求不同，如自生固氮菌能利用空气中的N2为氮源，因而培养基中无需氮源。
答案：B
13 解析：在分离土壤中某细菌时，应先选取土样（10 g），然后加无菌水获得土壤浸出液，并进行不同倍数稀释，最后将稀释液涂布到培养基表面进行培养，并分离和计数。
答案：C
14 答案：C
15 解析：选择培养是可以增加纤维素分解菌的浓度，所用培养基是液体培养基，以便于下一步的稀释操作。
答案：A
16 解析：能合成尿素分解酶的微生物可以分解尿素，所以氮源为尿素；而这种微生物为异养生物，所以其碳源为含碳有机物葡萄糖。
答案：D
17 答案：D
18 答案：B
19 解析：某些细菌如蓝细菌（蓝藻）、光合细菌以及红螺菌都能进行光合作用。生长因子是指微生物生长不可缺少的微量有机物，主要包括维生素、氨基酸和碱基等。而微生物的营养物质包括水、无机盐、碳源、氮源和生长因子，它们都是要从外界获得补充的。常用的伊红—美蓝乳糖培养基，可用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌，如果有大肠杆菌，因其强烈分解乳糖而产生大量的混合酸，菌体带H＋，故菌落被染成深紫色，从菌落表面的反射光中还可以看到金属光泽。
答案：D
20 解析：CO2是无机碳源，不能作为该微生物的能源物质。
答案：B
21 答案：（1）固体 选择 （2）异养型 酵母菌或霉菌
（3）（CH2O） 先调整pH （4）青霉素和（CH2O） 纤维素粉 （5）C
22 解析：回答（2）要注意答“适量的芽孢杆菌菌种”，不能简单答成“芽孢杆菌”，太少了可能得不到抗青霉素菌菌落。
答案：（1）青霉素 无菌 （2）适量的芽孢杆菌菌种
（4）A培养基的菌落 （5）获得纯度高的抗青霉素芽孢杆菌（分离出对青霉素有抗性的芽孢杆菌）
23 答案：（1）碳源 氮源 （2）数量 （3）平板划线法 稀释涂布平板法（稀释混合平板法） 灭菌
24 解析：培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。由于微生物具有不同的营养类型，对营养物质的要求也各不相同，加之实验和研究的目的不同，所以培养基的种类很多，使用的原料也各有差异，但从营养角度分析，培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐以及水分等。另外，培养基还应具有适宜的pH、一定的缓冲能力、一定的氧化还原电位及合适的渗透压等。通过观察培养基上菌落的多少，可确定湖水细菌污染程度。高NaCl浓度的培养基可筛选出耐盐的细菌。
答案：（1）氮源（碳源不作要求） 碳源 无机盐 水
（2）恒温培养箱 无菌水 （3）多 高 （4）盐（或NaCl） 选择性培养基
25 解析：（1）要获得分解原油的细菌，只有在以原油为唯一碳源的培养基中，这种细菌可以大量繁殖，而其他细菌不能生存。此种培养基属于选择培养基。（2）纯化菌种常用平板划线法和稀释涂布平板法。（3）在以原油为唯一碳源的培养基上，在菌落周围的原油被分解而形成分解圈，分解圈越大，说明该菌株降解能力越强。（4）实验室灭菌有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等，实验操作要在酒精灯火焰附近的无菌区进行。
答案：（1）原油 选择 （2）平板划线法 稀释涂布平板法 （3）强 （4）干热灭菌 高压蒸汽灭菌 火焰
26 解析：样品菌落数计算公式：（C/V）·M，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数。V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。
答案：步骤B：稀释混合平板法
结果分析：（1）D （2）1.17×107 （3）多 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落 （4）不能。因为不能排除杂菌来自培养基或来自培养过程。